医学微生物学精品课件：20.HIV、狂犬病v.pptVIP

四、微生物学检查 抗体检测：最常用 初筛：ELISA、IFA、RIA。 确认：免疫印迹技术，又称Western blot。 病毒或其成分检测 抗原测定：ELISA测P24 病毒分离与鉴定 核酸测定：RT-PCR 1.抗HIV抗体检测 为了最大限度地保证检测结果的准确性，HIV抗体检测常采用敏感性高的ELISA法进行初步筛选，初筛检测的宗旨是避免漏检，初筛呈阴性反应的样品可出具HIV抗体阴性报告，初筛为阳性反应的不能出具阳性报告；对初筛阳性者再用特异性强的免疫印迹技术（Western blot）进行确认。 已知HIV重组抗原与合成肽 常用ELISA双抗原夹心法检测HIV抗体进行初筛：由于某些病毒如CMV、EBV等；寄生虫如疟原虫；自身免疫病患者，如系统性红斑狼疮；MHC II类分子等与HIV有共同抗原导致交叉反应，在初筛检测时可能导致假阳性现象。 ？ 免疫印迹法检测P24及gp120、gp41抗体。 HIV裂解物PAGE电泳 转膜，加 待检血清 加酶标二抗及底物显色。至少出现2条带-阳性；只有1条带-不确定。 SDS裂 解HIV 2.HIV抗原检测 常用ELISA双抗夹心法检测HIV的衣壳蛋白P24。该抗原出现于急性感染期和AIDS晚期，可作为早期或晚期病毒量的间接指标。在潜伏期，该抗原检测常为阴性。 P24抗原检测可用于HIV抗体不确定或窗口期的辅助诊断；HIV抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断；临床一般不作为常规诊断项目。 3-4天 PHA 2-4周 4.T细胞计数 CD4+T细胞计数是反映HIV感染者免疫系统损害的明确指标 3.病毒分离：须在P3级实验室进行 淋巴细胞 患者标本 CPE（+） 检测培养液中逆转录酶活性或P24抗原 1.预防原则 ①开展宣传，普及预防知识；积极进行疫苗研制。 ②对血液、血液制品及医疗器械物品进行严格检查管理，减少医源性传播。 ③严禁吸毒、严禁共用注射器；加强性教育，提倡安全性行为。 ④感染HIV的妇女应避免怀孕；如果妊娠应给予抗病毒治疗；分娩方式应选用剖宫产；采用人工喂养。 五、防治原则 2.治疗原则 临床上常用的抗HIV药物主要有二类，即逆转录酶抑制剂和病毒蛋白酶抑制剂。目前多采用个性化联合用药方法——鸡尾酒疗法，在使用二种或二种以上抗HIV的逆转录酶抑制剂和病毒蛋白酶抑制剂的同时，进行免疫调节和抗感染治疗，可控制艾滋病病情的发展，延长患者的寿命。 AIDS的治疗 1995 年中国 AIDS 病人，每人每年的平衡药费约为8万元。 2002 年国内病人，每人每年的平均药费约3万元。 2002 年国家药监局批准仿制生产4 种国外抗 HIV 药物，即 齐多夫定（Zidovudine）、去羟肌苷（Didanosine）、司他夫定（Stavudine）和奈韦拉平（Nevirapine）。 国产化药物可使病人用药费用降至每年约 3000~5000元 研发自主知识产权的药物是一个十分迫切和重要的课题 狂 犬 病 病 毒 * * 1970年Temin等发现一种RNA病毒具有特殊的RNA聚合酶（逆转录酶），该酶能以RNA为模板，根据碱基互补原则，合成cDNA。这一发现改变了传统的分子生物学关于DNA ? RNA ? 蛋白质的概念。1975年因此获Nobel Prize。 逆转录病毒是一组含有逆转录酶的RNA病毒。 逆转录病毒（Retrovirus） 逆转录病毒的特性 具有包膜，圆球状。 基因组是正链RNA 在病毒颗粒中有逆转录酶 能整合于宿主细胞的染色体 Human Immunodeficiency Virus，HIV 人类免疫缺陷病毒 获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）即艾滋病，是由人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染引起的以免疫缺陷，特别是细胞免疫缺陷、机会感染、恶性肿瘤及中枢神经系统退行性病变为特征的临床综合征。 1981年6月，美国亚特兰大市疾控中心在《发病率与死亡率周刊》上简要介绍了他们发现的5例艾滋病病人的病史，这是世界上有关艾滋病的首次正式记载。1982年美国疾控中心将此病命名为获得性免疫缺陷综合征（AIDS），即艾滋病。1983年，法国巴斯德研究所从一名同性恋艾滋病患者的淋巴结分离出新病毒，并证实这种病毒是引起艾滋病的病原体。1986年，国际病毒分类委员会将此病毒命名为人类免疫缺陷病毒，即HIV。