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* * 实验四 主要内容 (一) 中性粒细胞的吞噬作用 (二) 溶菌酶试验 (三) 巨噬细胞的吞噬作用示教 血液中的小吞噬细胞即中性粒细胞,具有很强的变形运动能力,是机体发生急性炎症时的主要反应细胞。具有对异物吞噬、杀死和消化的功能,是机体防御功能的重要组成部分。检查其吞噬细菌的能力,有助于判断人体的免疫功能。 中性粒细胞的吞噬作用 [步骤与方法] 1.注射无菌肉汤1ml于小白鼠腹腔内,诱导浆液渗出,约需1小时。 中性粒细胞的吞噬作用(体内法) (2人/组) 2.给小白鼠腹腔内注射白色葡萄球菌菌液1ml,放入笼中,让小鼠活动。 3.分别于40分钟、60分钟后,抽取腹腔液涂片、干燥。最后将小白鼠拉脱颈椎处死。 40 [步骤与方法] 4.瑞氏染色:干燥后的标本片 → 瑞氏染液数滴(计数滴数)1 min → 加等量PBS继续染5min → 水洗 → 干燥 → 油镜观察 [结果] 可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色,而白细胞浆则为淡红色。 中性粒细胞的吞噬作用(体外法) [步骤与方法] 1. 取肝素溶液1~2滴加于玻片后端。 2.用酒精棉球消毒无名指端或耳垂皮肤,用无菌采血针刺破,再用一牙签刮取血液,即刻混在玻片的肝素溶液中抗凝。 3.取一接种环葡萄球菌,加于血滴中,且使之混和。将此玻片置于铺有湿滤纸湿盒内,加盖,放入37℃恒温箱45分钟。 [步骤与方法] 4.取出玻片,作成推片。只能推一次,切勿来回推。 5.干燥后用瑞氏染色法染色,油镜观察。 [结果] 溶菌酶是一种小分子蛋白质,存在于机体的血清、体液(泪液、唾液、痰液、尿液等)及细胞(白细胞等)中。测定它在血清、体液或分泌物中的含量及其变动情况可作为了解机体防御功能的一个指标。 溶菌酶试验(琼脂平板法 ) (4人/组) *
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