医学微生物学精品课件：实验3.pptVIP

* * 实验三 主要内容 （一）细菌的人工培养 （二）正常人体及环境中细菌的检查 （三）理化生物因素对细菌的影响 细菌的生长条件包括：①营养；②适宜温度；③一定的酸碱度；④适当的气体环境；⑤渗透压。 因此，可根据细菌对营养、PH、渗透压的要求制备细菌培养基。把细菌接种于培养基后，放恒温 （一般为37℃）箱内培养一定时间（通常18~24h），细菌便可大量繁殖，可进一步观察和研究其生物学特性。 细菌的人工培养 细菌的人工培养程序为 1. 估计标本中细菌种类、数量及培养目的等，选用适当的培养基及接种技术。 2. 适宜的气体环境，37℃，18~24h。 液体 培养基 斜面 培养基 接种技术一般分为分离培养接种法和纯种细菌接种法。 细菌的接种技术 被检材料如粪便、痰、脓汁、尿液等常混杂有多种细菌，平板划线法可使混杂的细菌在琼脂平板表面分散生长，各自形成不同的菌落，再根据菌落的形态特征，挑选单个菌落继续培养，以此分离获得纯种细菌，用于进一步研究、鉴定或保存。 平板划线的方法根据待检标本中细菌的数量来选择，可分为分段划线法和连续划线法两大类。 （一）分离培养接种法---平板划线法： 第一区划线 接种环灭菌 第二区划线 接种环灭菌 第三区划线 接种环灭菌 1．分段划线法（分区划线法）： 检查材料中含菌量较多时多用此法，以求获得孤立菌落。 2. 连续划线法： 检查材料中含菌量较少时可用本法。 （二）纯种细菌接种法 细菌经分离培养出单个菌落后，常需再移种至其他培养基中，以进一步鉴定或保存菌种。根据接种培养基之物理性状，纯种细菌接种法可分为斜面培养基接种、液体培养基接种和半固体培养基穿刺接种法三类。 斜面培养基接种法 一般用于纯培养。从平板上挑取单个菌落接种至斜面培养基上，培养后获得大量纯种细菌（有菌苔生长），可进一步对细菌进行鉴定或作为菌种保存。 正常人体及环境中细菌的检查（4人/组） 1. 皮肤细菌的检查 右手食指在平板培养基表面相应部位轻轻涂抹 普通培养基 4 3 2 1 2.水中细菌检查 无菌空平皿 污水1ml 倾注约50℃琼脂培养基1管（约14ml），摇匀。 倾注普通琼脂培养基时温度勿太高或太低！ 3. 空气中细菌的检查 打开皿盖，暴露在空气中5~10分钟 普通培养基 *