高效脱氮菌原生质体融合条件的研究.pdfVIP

第30卷 第7期 武 汉 理 工 大 学 学 报 Vo1．30 No．7 2008年7月 JOURNAL OF rgdJHAN UNIVERSITY OF TF~MNOIIlGY Ju1．2008 高效脱氮菌原生质体融合条件的研究 桑稳姣 一，王 磊1,3，刘 真 ，朱春花 ，高 兰1，章j2平 (1．华中科技大学环境科学与工程学院，武汉430074；2．武汉理工大学土木工程与建筑学院，武汉430070； 3．中南电力设计院，武汉430071) 摘 要：通过极限稀释法和平板划线分离法，从活性污泥中筛选并分离出A1、B1、C1共3株高效脱氮茵，其中A1为氨 氧化功能菌，B1为硝化功能茵，C1为反硝化功能茵。进行单重抗药性试验后，将它们作为亲本菌株进行原生质体融合 试验。试验确定了最佳原生质体融合条件：紫外线照射时间为60 s；PEG浓度40％，促融时间6 min；Ca2 浓度0．015 mol／L；pH l0．0，添加200 L细胞壁引物。试验通过双重抗药平板筛选得到最佳融合子，经测定，其脱氮效率提高了 27．3％。 关键词： 脱氮菌； 原生质体融合； 最佳融合条件； 融合子 中图分类号： TQ 314．25；X 172 文献标识码： A 文章编号：1671～4431(2008)07—0084—04 Experimental Condition Optimization Study on Getting Higher Efficiency Denitrifier Bacteria by Protoplast Fusion SANG Wen-jiao 一，WANG Lei ，LIU Zhen ，ZHU C_hun—hua ，GAO Lan ，ZHANG Bei—ping (1．School of Environmental ScienceEngineering，Huazhong University of Science and Technology， Wuhan 430074，China；2．School of Civil EngineeringArchitecture，Wuhan University of Technology， Wuhan 430070，China；3．Central Southern China Electric Power Design Institute，Wuhan 430071，China) Abstract： By using the methods of limiting dilution assay and flat crossed separation，five strains named A1，Bland C1 were cultured and isolated from activated sludge．It was identified that A1 WaS ammonia—oxdizing bacteria．B1 was nitrobacteria and C1 WaS donatorbacteria．After test of single antibiotics，they were used as parent strains to process protoplast fusion．The opti— mum conditions of protoplast fusion of this experiment were ascertained as following：time of UV-irradiation on the parent pro— toplast，60 s；PEG，40％；time of fusion，6 min；Ce2 ，0 ． 015 mol／L；pH，10．