人睾丸支持细胞的分离培养及鉴定.pdfVIP

( ) 湖南师范大学学报 医学版 　2008, 5 ( 1) ( ) J Hu nan N rma l U niv M ed Sc i 5 3 人 睾 丸 支 持 细 胞 的 分 离 培 养 及 鉴 定 1, 2 1 1 3 陶 　科 ,孙 　源 ,范立青 ( 1. 中南大 学生殖与干细胞工程研究所 ,湖南 长沙 　4 10078; 2 1湖南 师范大学医学院 ,湖南 长沙 　4 10006) 　　 [摘要 ] 　目的 :建立人胚胎睾丸支持细胞体外分离 ,纯化及培养 的方法 ,并进 行鉴定 。方法 :取胎龄 13 ～28周 的胚胎 睾 丸 ,采用两步酶消化 ,添加特定培养基 , 培养过程 中纯化 睾丸支 持细胞 ,并用 免疫荧光及 R T2PCR 技 术对培养细胞进行鉴定 。 结果 :通过检 测阶段特异性标记物 M IS提示胚胎睾丸支持细胞 占培养细胞总数的 90 % 以上 ,经 RT2PCR及 免疫 荧光检测所培 养细胞具有分泌产生 SCF 的能力 。结论 :在本研究建立的培养体 系下细胞 可稳定传代 , 经鉴定为高纯度的睾 丸支持细胞 , 并 维持了其体 内生物学活性 。 [关键词 ] 　睾丸支持细胞 ;分离 ;细胞培养 ;鉴定 [中图分类号 ]R 394　　　 [文献标识码 ]A 　　　 [文章编号 ] 1673 - 016x (2 008) 0 1 - 0005 - 04 Is la t i n , C u ltu r e an d Id en t if ica t i n f Hu m an Ser t l i C ells 1,2 1 1 3 TAO Ke , SUN Yuan , FAN L i2q ing ( 1. R esea rch Institu te f R epr d uct i n an d ES Cel ls, Gen tra l S uch U n iversity, Ch ang sha 4 10078, Ch in a; 21M ed icine Sch l, H una n N rm a l U n iversity, Ch ang sha 410006, Ch in a) [ Ab str a ct] O bject ive　The a mi f u r study w as t estab lish a m eth d f is la ti n , pu r ificati n cu ltu re and iden tificati n f r human feta l Sert li cells in vitr . M eth d s　The testes were b ta ined fr m fetu se s f 13 ～28 w eek f ge stati n. Testis cellsw ere c llec