P504S、P63、CK34βE12、PSA联合检测在前列腺良恶性病变中的表达及应用价值.docVIP

精品论文 参考文献 P504S、P63、CK34βE12、PSA联合检测在前列腺良恶性病变中的表达及应用价值 黄洪欣1 辛志峰2 姜长青3*（1山东青岛公安消防医院 山东青岛 266016) (2山东青岛崂山区妇幼保健院 山东青岛 266067；3山东青岛市立医院 山东青岛 266011） 【中图分类号】R697+.3 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）02-0045-03 【摘要】 目的 探讨P504S、P63、CK34beta;E12、PSA在前列腺良恶性病变中的表达及联合检测的应用价值。方法　应用免疫组化（增强型PV6000）对前列腺癌（PC）108例、高级别前列腺上皮内瘤变（HGPIN）10例、低级别前列腺上皮内瘤变（LGPIN）53例 、良性前列腺增生（BPH）90例进行P504S、CK34beta;E/12、P63、PSA联合检测。结果　P504s在PC组阳性表达率93.52%，明显高于HGPIN、LGPIN、BPH组（Plt;0.01）；CK34beta;E12和P63在PC组阳性表达率均为2.78%，明显低于HGPIN、LGPIN、BPH组（Plt;0.01）；PSA在4组前列腺病变中均为阳性表达。结论　联合检测P504S、CK34beta;E12、P63、PSA等4种标记物可提高前列腺良恶性疾病诊断和鉴别诊断的准确率。 【关键词】 前列腺癌 BPH PIN P504S 34beta;E12 P63 PSA 近年来在中国前列腺癌的发病率呈现上升趋势，其诊断虽然主要依赖于标准的HE染色,但实际工作中鉴别前列腺良、恶性病变还是较为困难。前列腺特异抗原(PSA)是目前最常用的前列腺病变标记物，但缺乏特异性。高分子量角蛋白CK34beta;E12和P63作为基底细胞特异性标记物，是鉴别诊断前列腺良、恶性病变的重要指标。国外研究报道，P504S(alpha;-甲酰基辅酶A -消旋酶)则是新近发现的前列腺癌细胞的阳性标记物[1,2]。本研究选取261例前列腺手术切除及穿刺活检标本进行P504S、PSA与CK34beta;E12和P63免疫组化联合检测，旨在探讨4种标记物检测在前列腺良、恶性病变诊断与鉴别诊断的应用价值。 1.材料与方法 1.1 材料 选取青岛市立医院病理科2007～2011年前列腺手术切除及穿刺活检标本261例，按病变性质分4组：前列腺癌（PC）108例，高级别前列腺上皮内瘤变(HGPIN)10例，低级别前列腺上皮内瘤变(LGPIN)53例，良性前列腺增生(BPH)90例。前列腺癌患者年龄53～91岁，平均72岁。 1.2试剂　 即用型兔抗人P504S单克隆抗体工作液、即用型鼠抗人P63、CK34beta;E12、PSA单克隆抗体工作液、增强型PV6000超敏免疫组化试剂盒均购自北京中衫金桥生物技术有限公司。 1.3方法　 所有标本均采用4%的中性福尔马林固定。组织经常规处理，石蜡包埋，4mu;m连续切片，HE染色，显微镜观察。将石蜡切片常规脱蜡至水后置修复液中高温高压抗原修复，0.3%的H2O2-甲醇液封闭内源性过氧化物酶，一抗4℃过夜，相关二抗，DAB显色, 苏木素复染，中性树胶封片。以PBS代替一抗作为阴性对照，P504S、P63、CK34beta;E12和PSA已知阳性切片作为阳性对照。 1.4Gleason评分方法　 PC的HE染色切片在光镜下按Gleason分级标准进行评分，具有2种结构类型的Pca，Gleason评分=主要结构类型(级别) +次要结构类型(级别)，只有1种结构类型的Pca，视为主要结构类型和次要结构类型相同。按Gleason分级评分结果分成两组，2～6分26例，7～10分82例。 1.5结果判断 P504S和PSA阳性表达定位于癌细胞或腺上皮细胞的细胞浆，CK34beta;E12阳性染色定位于基底细胞的细胞浆，P63阳性染色定位于基底细胞的细胞核。P504S以低倍镜(times;100)下能看到胞质出现棕黄色着色为阳性，按染色强度计分：阴性(-)，细胞不着色或背景同阴性对照；弱阳性(+)，低倍镜下能看到浅的棕黄色着色,高于背景颜色，高倍镜下能看到胞质内较少的棕黄色颗粒；阳性(++)，低倍镜下看到胞质内明显的棕黄色颗粒；强阳性(+++)，棕黄色着色颜色深,密度大，非常明显。 1.6统计学分析　 采用SPSS17.0版统计软件包进行统计学分析，数据采用chi;2检验或Fisher确切概率法，Plt;0.05为差异有显著