eIF4E、survivin在儿童喉乳头状瘤组织中的表达及意义.docVIP

精品论文 参考文献 eIF4E、survivin在儿童喉乳头状瘤组织中的表达及意义 周强 陶菁（通讯作者） 张英 龙安予 （郑州市儿童医院病理室 河南郑州 450052） 【摘要】 目的 通过检测真核起始因子4E（eukaryotic initiation factor 4E，eIF4E）、survivin蛋白在小儿喉乳头状瘤及声带息肉组织中的表达情况，探讨它们在喉乳头状瘤发生、发展过程中的作用。方法　采用免疫组织化学技术检测eIF4E、survivin蛋白在48例儿童喉乳头状瘤和15例声带息肉组织中的表达情况。采用半定量积分法，将阳性细胞百分率和染色强度相结合判定免疫组化染色结果，用spss13.0软件进行统计学分析。结果　eIF4E、survivin蛋白在喉乳头状瘤组织中的阳性表达率分别为85.42%、81.25%，均明显高于它们在声带息肉组织中的表达率26.67%、46.67%，两者差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　eIF4E、survivin蛋白在儿童喉乳头状瘤组织中高表达，提示其与儿童喉乳头状瘤的发生、多发性可能有密切关系。 【关键词】喉乳头状瘤 eIF4E survivin 免疫组化 喉乳头状瘤（Laryngeal papilloma）是喉部最常见的良性肿瘤，可发生于任何年龄，尤其多见于10岁以下儿童[1]。研究认为其发病与感染人乳头瘤病毒有关，最常见发病部位为喉部。临床特征主要为生长迅速、多发性及治疗后易复发，目前尚无有效的预防复发的方法。 eIF4E基因是一个重要的原癌基因，编码25KD的蛋白eIF4E，参与组成eIF4F复合体(eIF4E、eIF4A、eIF4G)，可特异性地与真核细胞mRNA的5rsquo;末端帽结构结合，在翻译起始阶段起限制调控作用。eIF4E的过度表达可导致细胞生物学行为的异常改变，包括促进细胞的快速增殖，以及细胞的恶性转化。有研究表明，eIF4E在一些人类肿瘤组织和肿瘤细胞株中呈现高表达水平。 细胞凋亡是细胞在生理或病理条件下由基因调控的程序性死亡过程，主要功能是清除机体衰老的、损伤的或基因突变的细胞。凋亡功能受损使突变基因在细胞内累积，通过延长细胞周期、逃避免疫监视等机制最终导致肿瘤形成。Survivin是Amborsinitll等[2]发现的凋亡抑制蛋白家族新成员，通过一个杆状病毒重复序列抑制凋亡，在许多胚胎组织细胞及大多数人类恶性肿瘤组织中??表达，而在正常的成熟组织中不表达或低表达。本研究采用免疫组织化学技术检测儿童喉乳头状瘤组织及声带息肉组织中eIF4E和survivin的表达情况，以探讨它们在喉乳头状瘤形成、发展中的作用，为今后开展喉乳头状瘤的靶向生物治疗提供理论支持。 1 材料与方法 1.1材料 收集我院2000年6月至2012年11月手术切除并经病理证实的喉乳头状瘤标本50例，其中男性27例，女性23例，平均年龄4.37岁。所有患者术前未经过药物及放化疗治疗。同时收集经病理证实为声带息肉的组织15例作为对照组，其中男性9例，女性6例，平均年龄5.7岁。所有标本经甲醛固定后做石蜡包埋，4mu;m连续切片，苏木精—伊红染色及免疫组织化学染色。 1.2免疫组织化学试剂 鼠抗人eIF4E多克隆抗体（美国Santa Cruz公司）；鼠抗人Survivin多克隆抗体（美国Santa Cruz公司）；免疫组化SP试剂盒（武汉博士德工程有限公司）。 1.3免疫组织化学染色 石蜡切片置烤箱内60℃120min利于切片粘附。石蜡切片常规脱蜡至水，3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶，微波修复后参照SP试剂盒说明书操作程序进行，用已知的eIF4E阳性表达的乳腺癌组织做阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照，DAB显色后，苏木素—伊红复染，中性树胶封片。 1.4免疫组化结果的判断及计数方法 eIF4E和survivin蛋白免疫组化阳性信号均呈棕黄色，定位于细胞质内。高倍镜下每张切片随机选取5个视野，按阳性细胞百分比及着色深浅进行结果判定。评分标准：①阳性细胞数计分：lt;1%为0分；1%-25%为1分；26%-50%为2分；51%-75%为3分；gt;76%为4分。 ②细胞着色强度计分：无显色为0分；淡黄色为1分；棕黄色为2分；棕褐色为3分。最后综合两部分得分进行综合评分，按评分积分值进行统计学处理。 1.5统计学处理 所有数据均经SPSS 13.0进行统计分析，计量资料采用-xplusmn;S表示，两组均数的比较用t检验(t-test)；两组以上均数的比较用方差分析（ANVOA）；以alpha;=0.