EGF 61GA基因多态性与胃癌的关系.docVIP

精品论文 参考文献 EGF 61GA基因多态性与胃癌的关系 林逊汀1 吴国洋2(通讯作者) 傅锦波 3 (1厦门大学附属中山医院消化内科 福建厦门 361004) (2厦门大学消化疾病研究所 福建厦门 361004；3厦门市消化疾病中心 福建厦门 361004) 【摘要】目的 研究表皮生长因子(EGF)61*G/A基因多态性与胃癌之间的关系。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测胃癌及正常对照组的EGF 61*G/A 基因型。 结果 胃癌患者EGF 61*G/G 基因型或61*G等位基因明显高于对照组，G/G 基因型在两组间差异有统计学意义（x2=5.442，P=0.020；OR=1.852，95%=1.101-3.114），G等位基因在两组间差异没有统计学意义（x2=5.861, P=0.015；OR=1.629，95%=1.096-2.421）。结论 EGF 61*G/G 基因型与胃癌的生成相关。 【关键词】 EGF 基因多态性 胃癌 【中图分类号】R730 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）32-0231-02 引言 表皮生长因子（Epidermalgrowthfactor，EGF）是最早发现的生长因子,对调节细胞生长、增殖和分化起着重要作用。人的表皮生长因子蛋白有53个氨基酸残基，三个二硫键。表皮生长因子通过与细胞表面的受体表皮生长因子受体(EGFR)结合而起作用，激发受体内在的酪氨酸激酶的活性，从而启动了信号传导级联而导致多种生物化学变化，细胞内钙水平上升，增加糖酵解与蛋白质合成,增加某些基因(包括表皮生长因子受体)的表达，最终导致DNA合成和细胞增殖。 胃癌是常见的恶性肿瘤之一，在全球范围内平均每年死亡病例7000,000，因癌症致死的疾病中排名第二，仅次于肺癌。世界各地胃癌的发病率呈逐年上升趋势，其中约2/3病例发生在发展中国家，42%发生在中国。 表皮生长因子(EGF)61*G/A 基因多态性与皮肤黑色素瘤、神经胶质瘤、原发性肝癌和结直肠癌相关[2-7],但EGF 61*G/A基因多态性与胃癌发生关系的研究结果尚有矛盾[8,9]。本文将对EGF 61*G/A基因多态性与胃癌的关系进行病例-对照研究，并将结果报告如下。 1 资料与方法 1.1 临床资料 病例为我院普通外科2009年1月至2011年12月间收治的114例胃癌患者，男98例，女16例，年龄31～85岁。对照组为120例无癌肿的健康人，男95例，女25例，年龄36～67岁。所有胃癌患者经手术病理证实。 1.2 方法 通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测EGF 61*G/A基因型。胃癌患者及对照组健康人抽取的外周血液存于含枸橼酸钠的抗凝管中，放置于-80℃冰箱中冻存。用QIAGENTM公司DNA试剂盒提取DNA。PCR扩增含有EGF 61*G/A 基因的DNA片段，引物序列[2]分别为：(1)5-TGTCACTAAAGGAGGT-3 (2)5-TTCACAGAGTTTAACAGCCC-3。50mu;l反应体系含：10*PCR buffer 5mu;l,10mM dNTP 2mu;l,10uM引物各3mu;l,50mM MgCl2 3mu;l,TaqDNA聚合酶（5u/mu;l）0.4mu;l。反应体系经94℃5分钟变性后，以94℃1分钟，72℃1分钟循环35次，最后72℃延伸10分钟。Roche公司购买的限制性内切酶AluI（限制性内切点为AG▼CT）消化EGF PCR产物2小时。3%琼脂糖凝胶电泳分析酶切片段，确定EGF61基因型。 1.3 统计学处理 统计学分析采用SPSS13.0软件进行。直接计数法计算EGF 61*G/A基因型频率和等位基因频率。各组基因型和等位基因频率比较采用卡方检验。 2 结果 2.1 EGF 61*G/A基因多态性酶切后3%琼脂糖凝胶电泳成像 EGF61*G/A基因PCR扩增片段为242bp。EGF61*A/A基因型可被酶切成102bp、91bp、34bp和15bp4个片段，EGF61*G/G基因型可被酶切成193bp、34bp和15bp3个片段，EGF61*A/G基因型可被酶切成193bp、102bp、91bp、34bp和15bp 5个片段（见图1）。 图 1. EGF 61*G/A 基因多态性酶切结果。 1