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分子生物学实验-理论讲授;概要;一、分子生物学的基本含义;分子生物学研究三大领域;;分子结构生物学 分子发育生物学 分子神经生物学 分子育种学 分子肿瘤学;分子生物学发展简史;二、基因工程;基因工程;1996年，英国科学家伊恩·维尔穆特博士用成年羊的体细胞克隆出了一只小羊。 克隆技术发展中成功克隆的二十余种动物。;;基因工程试剂的高回报;农业部谈非转基因广告：“与食品安全无关联”。 中国工商部“禁止在广告中宣称非转基因产品更健康、更安全”。;基因工程的组成;主要内容和步骤;基因工程的基本条件;1.外源DNA;2.载体;2.1载体的功能;2.2载体特征;2.3多克隆位点;2.4遗传标记基因;lacZ蛋白分为α链和β链。只有当两者都存在时才会表现出活性。 蓝白斑筛选是一种基因工程常用的重组菌筛选方法。野生型大肠杆菌产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲??-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。使整个培养菌落颜色变化，是鉴定和筛选的最直观有效的方法。 ;2.6蓝白斑筛选原理;lacZα;3.工具酶;3.1限制性内切酶;3.2DNA连接酶;3.3DNA聚合酶;4.基因工程受体;4.1受体类型及特征;基因工程实验需要掌握的技术;5主要步骤;5.1连接产物转化细胞;氯化钙法;5.2重 组 子 的 筛 选;5.3聚合酶链式反应;5.4琼脂糖凝胶电泳;三、重组人白介素-18(rhIL-18)基因工程菌的构建;白细胞介素18;基因、载体、受体菌株;实验技术要求;实验流程: 第一天 8AM-5PM;连接反应中 目的基因：质粒=3：1 连接反应体系中加入目的基因和质粒酶切片断的体积比 ;实验流程: 第二天 8AM-5PM;实验流程: 第三天 1PM-5PM;;实验流程: 第四天 8AM-5PM;Science：2013年度十大科学突破;Nature Methods十周年，十大技术盘点;End
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