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JLU 果蝇唾液腺染色体的制片与观察 王飞 fei@jlu.edu.cn 多线染色体（polytene chromosome）* 1881年首次发现 在双翅目昆虫的分泌组织细胞内存在一种光学显微镜下可见的巨大染色体。称为多线染色体，是细胞内持续进行的DNA的复制造成的。这种细胞不分裂而DNA持续复制的现象被称为核内有丝分裂（endomitosis）。多线染色体的每一条染色单体都拥有数千个拷贝。 多线染色体的生理意义 * 分泌腺体需要在一定空间范围内具备高效分泌的能力——细胞体积大、蛋白合成能力强。 多线染色体能够增加细胞核体积，进而增加细胞体系。 多线染色体每一个基因具有数千拷贝，为细胞提供更高的基因表达水平，提高蛋白合成能力。 多线染色体的形态特点 * 1 拟联会（体细胞联会）：同源染色体的同源臂紧密结合，在DNA复制过程中新产生的染色质纤丝互相缠绕，在光学显微镜下只显示为一条很粗的染色体臂。 2 染色中心：所有染色体的着丝粒及附近的异染色质区域都集中在一起，染色后形成一个深色的染色中心。 3 多线染色体形态：以染色中心为中心，向四周伸出数条拟联会染色体臂。 果蝇唾液腺染色体形态 * 黑腹果蝇 2n=8 5长臂 1短臂 果蝇唾液腺染色体形态 * virilis果蝇 2n=12 5长臂 1短臂 多线染色体的带型（banding pattern）* 深色带：螺旋程度高、难接近、非活化 浅色带：螺旋程度低、易接近、活化 胀泡（puff）：基因活跃转录区域 带型：种属特异性（缺失、重复、倒位、易位） 实验目的 掌握果蝇唾液腺染色体的制片技术 了解唾腺染色体的形态特点。 实验材料及流程 * 果蝇三龄幼虫 virilis 2n=12 melanogaster 2n=8 流程：剥离唾液腺-解离-染色-压片-镜检 1 剥离唾液腺 唾腺位置：头部两侧、位置在虫体的1/3-1/4 生理盐水：0.7% NaCl * 2 解离 * 目的：破坏胞间质及组织结构，使细胞容易散开 方法：1M HCl 室温 处理3-5min 3 染色 染色液：石碳酸品红（卡宝品红），染色质特异染料 步骤： 1 滴加1-2滴染色液 2 染色8min 4 压片 单侧慢放盖玻片（领取） 用解剖针轻敲样本上方使其组织细胞分散 用拇指按压载玻片使细胞膜破裂，细胞质流走，染色体臂散开 5 镜检 JLU
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