pcr技术诊断伪狂犬病的应用研究.pdfVIP

广两大学硕士学位论文 摘要 I)基因的两对引物 基因的一对引物(gpl／gp2)和gE(g PR诊断，结果阳性率为58．5％。所检的病料中，有两份是经PCR扩 弱毒疫苗NIA。。。株均不能扩增出特异的核酸带。 f4在同一猪体不同组织器官材料的检测中发现，检出率最高的是 脑，其次是各组织器官(检出率从高到低依次是扁桃体、肝、脾、肾)。 在两份健康猪所采集的组织材料的检测中发现，其中一份材料PCR 扩增为阳性。以上结果表明，目前PR在广西的流行仍很严重；PRV 的潜伏感染及与其他病毒的混合感染问题值得注意。本研究为广西猪 PR分子流行病学研究和探索猪PR野毒株与弱毒疫苗株的鉴别诊断 ／ 奠定了一定的基础。，／ 关键词：伪狂犬病PCR诊断{善希， 广西大学硕士学位论文 前言 diease，AD)，是 伪狂犬病(pseudorabies，PR)又称奥叶兹基氏病(Aujeszky’S 畜禽、野生动物的一种以发热、奇痒(猪一般除外)、呼吸和神经系统疾病为特 征的急性传染病【1’2I。猪是本病毒最重要的贮存宿主和传染来源。该病属于典型 且极难防疫的自然疫源性疾病之一。 181 902年匈 3年美国首先发现本病fJoJ，当时表现为牛的一种“疯痒病”，1 934年正式确定为 牙利学者Aujeszky通过兔子接种试验将其与狂犬病相区别，1 疱疹病毒所致1”。近年来在分类学上又称猪伪狂犬病病毒为猪疱疹病毒1型， 将后来发现的猪包涵体性鼻炎病毒称为猪疱疹病毒2型。目前，除澳大利亚外， 947年刘 世界上许多国家均有本病的报道，而且发病率不断上升[2A61。我国自1 永纯i7】首次从猫体内分离出PRV以来，已有20多个省市报道流行伪狂犬病， 黄骏明等【141对黑龙江、吉林、内蒙古等四个省34个猪场送检的病料进行流行 5】应用所建立的ELISA 病学调查，其结果阳性场占58．82％(20／34)。蒋玉雯等【l 方法对广西八个地区25个养猪点的280头份猪血清进行猪伪狂犬病血清学调 查。结果，在六个地区检出阳性22头份，阳性率为5．8％。国内70年代前本病 只有零星散发，而80年代后出现地方流行与零星散发，90年代以来则表现为 地方流行与爆发病例。综合国内、外情况，该病的流行正呈现日益上升趋势【11】。 PRV主要引起妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎等繁殖障碍，其中主要以产 死胎为主；仔猪出现神经症状，2周龄以下仔猪死亡率几乎100％；育肥猪生长 受阻；种猪种用性能降低或丧失；感染耐过猪或亚临床感染的成年猪，长期带 毒和排毒，带毒率以肺、肝为最高，脾、肾居次。隐性带毒，断续或持续地排 毒是猪场一旦感染不能长期根除的原因。国外一些专家认为，PR所造成的损失 andmouth 仅次子口蹄疫(Foot cholera，HC)，应在 disease，FMD)和猪瘟(Hog 一定范围内制定特异的诊断、预防和根除的国家规划。 1 广西大学硕士学位论文 kb，分子量为87×106kd，G+C含 PRV基因组为线性双股DNA．大小约150