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2016-03-02 发布于贵州
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prrsv病毒离及其orf5基因序列分析.pdf

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prrsv病毒离及其orf5基因序列分析

摘要猪繁殖与呼吸综合征(Porcine and ReproductiveRespiratorySyndrome，PRRS) 是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起猪的一种新型传染病。该病自1987年首次在美国发现以来，迅速遍及世界各地，它所引发的“流产风暴”使养猪业蒙受了灾难性的经济损失。本研究采集PRRS疑似病料142份，在猪肺泡巨嗜细胞上进行病毒分离，成功分离到15株毒株。根据GeneBank中PRRSV美洲毒株(VR2332)基因序列设计合成了针对株细胞培养物中扩增出大小约760bp片段，克隆入pMDl8一T载体后，送往宝生物工程技术有限公司测序。应用DNAStar软件对所测基因的序列与国内外已发表毒株的序列进行同源性比较，构建基因进化树，并对其推导氨基酸序列及GP5蛋白的一些特性与国内外已发表毒株进行比较。分析结果表明15株分离毒株与PRRS美洲型毒株亲缘关系较近，推导氨基酸序列同源性为88．9％一99．8％，并且15株分离株位于遗传进化树的同一分支上，推测它们源于同一个毒株。关键词：PRRSV,PAMs病毒分离；ORF5基因；序列分析 Gene IsolationofPRRSVandAnalisisofIt’SORF5 ^bstract a infectious ThePorcine and new ReproductiveRespiratorySyndrome(PRRS)is diseasecaused and bYporcinereproductive syndrome respiratory out in havetook in thediseasebrokefirstAmericain1987，great pig damages place industry． This usePorcineAlveolar isolatevirusfromtissue research Macrophages(PAMs)tO and15virusare fromthem． of that isthePRRSVinfection isolated pigs diagnosis totheORF5 the ORF4and ORF6 According genesequence(containedpartial partial PRRSVVR2332inGeneBankto and gene)ofAmerirantype designsynthesizesprimers， about eDNA were RT-PCRand of15isolates by sequenced 760bp sequence amplified after