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2016-03-02 发布于贵州
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prrsv国内离毒株病毒结构蛋白抗原表位鉴别及其orf5的rflp分析.pdf

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prrsv国内离毒株病毒结构蛋白抗原表位鉴别及其orf5的rflp分析

壁主兰壁垒茎塑蔓薹苎垒些查兰——一摘要本研究通过对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PItRsV)国内分离毒株的GP3、GP5和N蛋白的抗原性比较及其ORF5和ORF7遗传变异性分析，系统研究了国内分离毒株的抗原特性抗原多样性及其ORF5和ORF7的遗传变异性进行了比较研究。主要目的是通过针对GP3、 GP5和N蛋白单抗对PRRS分离毒株的抗原表位进行鉴定，比较其抗原性差异，试验结果表明国内PRRSV分离毒株与美洲毒株VR．2332在结构蛋白上有很高的同源性，而与欧洲型毒株LV在抗原上差异较大；利用2套针对PRRSVORF7特异性引物扩增了国内分离毒株的ORF7片段，通过琼脂塘凝胶电泳与欧洲型(A型)、美洲型(B型)PRRSV 的ORF7片段比较．证明国内分离毒株的基因型属于美洲型(B型)。在此基础上，扩限制性内切酶获得了各毒株的ORF5基因限制性酶切图谱，经RFLP分析表明国内分离毒株与美洲型强毒株有着相同的RFLP图谱，而与疫苗毒的RFLP图谱存在明显差异，进一步证明国内分离毒株的基因型属于美洲型的强毒株。由此可见，通过比较分离毒株ORF5 的RFLP图谱．可以对PRRSV(B型)强、弱毒进行区分。本研究为分离毒株的抗原特性研究、基因型(血清型)的鉴定及强、弱毒的鉴别提供了强有力的技术手段。关键词：PRRSV结构蛋白抗原表位 RFLP The and of and reproductiverespiratory variabilityporcine antigenicgenetic inChinawe”studiedimmunofluorasent virus(PP．RSV)isolates by monolayer syndrome rdstriction reverse fragmentlengthpolymorphism(RFLP)of assays(IFMA)and chain polymerases transcription(RT)and to isolates．Theaimis characterizethe of 8Chinese antigenic fragmentsamong epitopes witha of1l ofChina monoclonalantibodies PRRSVisolatesfromdifferent panel parts indicatedthatthe isolates isolate It ChineSe raised AmericanPRP．S ISU—R belong against toNorthAmerican ofdifferent ofORF7wereusedtoidentify group．Twopairs primers