prrs病毒持性感染对细胞因子mrna转录的影响及病毒核酸分布动态.pdf

中国农业大学硕士论文 中文摘要 本研究通过构建细胞因子IL一2、IL一4和IL一10的缺失cDNA竞争分子，利用竞争PCR 技术定量检测猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒持续性感染过程中细胞因子mRNA转录水平 的变化，并对人工感染后100天内PRRS病毒的核酸分布动态及持续性感染进行了研究。研 究结果如下： 接尸弓牛姥匏』～牛李芦分 ／1．用RT—PCR技术从猪外周血单核细胞中用RT-PCR技术扩增和克隆了猪细胞因子IL一2、 的缺失cDNA竞争分子；通过竞争PCR方法，建立了IL一2、IL一4和IL一10的标准竞争曲线； 并通过ORIGIN5软件分析得到上述细胞因子的直线回归方程。 后发现：Thl型细胞因子IL一2的cDNA水平在感染后24小时内迅速升高，然后迅速F降恢 复正常；至感染后28天，IL一2 cDNA水平又再次升高至一更高峰，迅速卜．降后，在56天 形成一较弱的峰，以后又下降恢复正常；而Th2型细胞因子IL一4的cDNA水平在病毒感染 后56天内，一直处于低水平，而后才迅速升高：IL一10的cDNA水平在病毒感染后6天内， 一直处于低水平状态，在第6天后，IL一10 cDNA水平逐渐上升，至42天到达顶峰，而后 迅速下降。 发现：感染后24小时即发展为病毒血症，病毒血症在感染后6—7天和第28天分别从血清 中消失，又在感染后14天和42天，病毒血症再次出现。肺、脾、淋巴结及扁桃体组织中 均有病毒核酸分布。至56天病毒核酸仅能在血清和肺中检测到，而至100天实验结束时其 它组织中仍有核酸分布。 本研究为进一步开展!羔!曼病毒引起机体免疫应答和持续性感染的研究提供了实验依 据，为深入阐明PRRS病毒的免疫机理奠定了良好的基础。)，，。 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒：细胞因子 持续性感染 定量竞争PCR X—————— 融、 ； ，…l !里查些查堂堡主丝兰 一—— Abstract mRNA levels PCR transcription Weuseda assay(cPCR)toquantify competitive and to respiratorysyndrome(PRRS) reproductive ofswinecvtokinesresponsesporcine and distribution acid thenucleic dynamic virus infectionandstudied persistent inindividual infected aperiod DersistenceofPRRSV experimentallypigs，during ofthis are1