分子印迹电化学传感器测定L-色氨酸的研究.pdfVIP

第 27卷第3期 分 析 科 学 学 报 2O11年 6月 V01．27 No．3 J0URNAL OFANALYTICAISCIENCE June 2011 文章编号：1006～6144(2011)03—0331-05 分子印迹 电化学传感器测定 L一色氨酸的研究 齐文静 ，张义根 ，刘 瑛 ，宋启军 (江南大学化学与材料工程学院，江苏无锡 214122) 摘 要 ：报道 了一种 由溶胶一凝胶法制备 的分子印迹 电化学传感器，并用于 L一色氨酸的 测定。印迹聚合物是 由四乙氧基硅烷、甲基三 甲氧基硅烷 、苯基三 甲氧基硅烷等聚合而 成 ，L一色氨酸为模板分子。通过循环伏安法验证 了印迹膜 与模板分子 的结合和去除 。 该传感器对 L一色氨酸具有良好的选择性以及高的灵敏度 ，线性范围为 1．0×10～～1．0 ×10 mol／I (r一0．9958)，检 出限为 1．0×10 mol／L。该法可不经分 离直接 用于 人血清中L一色氨酸的测定，回收率在 8O．0 ～104 范围。 关键词：电化学传感器；分子 印迹聚合物 ；L一色氨酸 中图分类号 ：O657．15 文献标识码 ：A 色氨酸是一种构成蛋 白质分子的必需氨基酸 ，是许多活性物质的前体 ，同时也是建立和保持 良好氮平 衡的一种重要物质 。在人体 内，色氨酸有两种代谢途径 ，最终产物为 5一羟吲哚乙酸 (5-HI—AA)和犬尿 酸_】]。研究发现 L一色氨酸对于抑郁症 、失眠症、高血压以及止痛等都有一定影响 。氨基酸测定方法很 多_l3]，如氨基酸分析仪、高效液相色谱法、毛细管电泳法、荧光光谱法和分光光度法等。但这些方法大多需 要分离或需要对氨基酸进行衍生化 ，测试过程复杂 ，因此 ，有必要寻找一种有效、快速且灵敏度高的检测 方法 。 近几年来 ，分子印迹技术 (MolecularImprintingTechnique，MIT)以其通用性和高选择性受到人们 的青睐。已有文献_l4报道分子印迹电化学传感器测定 L一色氨酸的方法，但 由于其制备方法的限制，传感 器选择性、灵敏度偏低 。本文参考文献 ]，采用溶胶一凝胶法 ，以色氨酸作为模板分子制备 了分子印迹电 化学传感器 。结果表明，该传感器具有 良好的选择性及较高的灵敏度 ，可不经分离直接用于血清 中L一色 氨酸的测定 ，具有广阔的应用前景 。 1 实验部分 1．1 主要仪器与试剂 电化学测量使用 IM6型电化学工作站 (德 国，Zahner公司)，采用常规 的三电极体系：工作电极为直径 3mm的玻碳电极或溶胶一凝胶分子印迹膜修饰 电极 ，参 比电极为 Ag／AgC1(fg和 KC1)电极，对电极为铂 丝 。Waters515型高效液相色谱仪 ，色谱柱为 C18柱 (125×4mm，5 m)，Waters2487紫外检测器 。 四乙氧基硅烷 (TEOS，98 )、甲基三 甲氧基硅烷 (MTMOS，97 )、苯基三 甲氧基硅烷 (PTMOS， 85 )购 自ACROSOrganics(比利时)；无水乙醇、盐酸 、甲酸 (88 )、L一色氨酸 、L一酪氨酸、L一苏氨酸、L一丝 氨酸、D一色氨酸 ，磷酸二氢钾均购 自上海国药集团；实验用水为去离子水 (18MQ·cm)。 1．2 样品处理 人血清样品由江南大学医院检验科提供。取适量血清于塑料离心管中，加入等体积的5．0 高氯酸 溶液混旋 1min后，以15000r／min离心 10min，取上清液作为供试样品_g]。 收稿 日期 ：2010—06—18 修 回 日期 * 通讯作者：宋启军，男，博士，教授，主要从事化学传感器的研究 331 第3期 齐文静 等 ：分子 印迹 电化学传感器测定 L色氨酸的研 究 第27卷 1．3 实验方 法 将玻碳电极依次用0．5、0．05 m 的AlO。粉末在麂皮上面打磨至镜面 ，然后分别用