分子生物学技术在皮肤癣菌分类鉴定研究中的应用.pdfVIP

维普资讯 · 754 · 堕堂绫 生箜l鲞第 12期 Me~cMRecapitulate2004，v01．10，N。．12 分子生物学技术在皮肤癣菌分类鉴定研究中的应用 牛桃香(综述)，骆志成(审校) (兰州医学院第二附属医院，甘肃 兰州 730030) 关键词：皮肤癣 菌病 ；皮肤癣菌 ；分子生物学 ；分类鉴定 ；聚合酶链 PCR—RFLP技术是一种在菌种水平上鉴定皮肤癣菌的简单、快 反应 速和有效 的方法。Shin等 以4种 限制性 内切酶 (BsYiI、 中图分类号 ：R756 DdeI、Hinfl和MvaI)对 36株 l2种皮肤癣菌 ITS区扩增产物进 文献标识码 ：A 行酶切 ，结果除了红色毛癣菌与 T．raubitscbekii表现为4种酶 文章编号 ：1006—2084(2004)12—0754-03 切图谱全部相同外，任意两种酶切图谱的结合均可将其余菌 皮肤癣菌是浅部真菌病的主要致病菌 ，由它引起的皮肤 种进行 区分 ，其中9株须癣毛癣菌产生了两种不同的带型 ，且 癣菌病呈逐渐上升趋势，有些菌种导致的手足癣和甲癣较难 带型与形态学之间无相关性 。 治愈，而且容易复发和再感染。对皮肤癣菌的快速、准确的鉴 Jackson等 针对红色毛癣菌 l8SrDNA和邻近 ITS区序列 定和分类将对确定感染、传染源和选择敏感 的抗真菌药物及 设计出一个探针与基因组 DNA的 EcoRI酶切片段进行杂交 ， 监视治疗效果等具有重要意义。传统的鉴定分型主要依靠培 根据 RFLP结果将50株红色毛癣菌的临床随机分离株分 A—N 养的菌落特征、镜下孢子和菌丝的形态 以及生理生化试验。 共 l4个型，其 中A—D四型 占全部菌株 的78％，而 A型独 占 这类方法一般只能达到种间的鉴别 ，而且 易受培养条件及人 38％，这种偏态的菌株类型分布提示某些菌株可能具有较强 为因素的影响，尤其是皮肤癣菌的菌落易发生变异，常常不能 的感染性、侵袭力或其他毒力特点，所以能够长期存在和广泛 准确反映遗传本质。近年发展起来 的以聚合酶链反应为基础 传播。Mochizuki等 以MvaI和 Hinfl酶切扩增rDNA的ITS区 的分子生物学技术克服 了表型分型 的不足 ，在真菌 的鉴定分 产物来鉴定分离 自日本 的26株断发毛癣菌 ，并与红色毛癣 型方面显示出较大的优势和潜力。本文对几种分子生物学技 菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌等 比较 ，结果显示断发毛癣菌 术 的特点及近年来在皮肤癣菌鉴定分型研究中的应用进行综 的MvaI酶切图谱明显有别于其他菌种 ，且无种 内多态性 ，整 述 。 个试验在 8h之内完成 ，故 PCR—RFLP可快速有效地鉴定断发 1 聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析 (PCR．RFLP) 毛癣菌。Kawasaki等 用 mtDNA的RFLP分析将 l2种小孢子 RFLP分析是利用限制性核酸 内切酶将 DNA在特定的核 菌和 l0种节皮癣菌 (共38株菌)分为 l3个群 ，在以此建立 的 苷酸序列上进行切割 ，由于不同的生物个体的酶切位点可以 种系发生树上 ，奥杜昂小孢子菌 、朗 日龙小孢子菌 、歪斜小孢 不同，从而产生的DNA片段长度呈现多态现象 ，在凝胶 电泳 子菌 、马类小孢子菌 、铁锈色小孢子菌及 M．r