吸光光度法的应用讲解.ppt

Analytical Chemistry 分析化学 ? 由题意： AHIn=0.890 Ain =0.260 ? 代入 ? pH=2.99 pKa =3.33 ? pH=3.41 pKa =3.35 ? pH=3.95 pKa =3.34 ? 求平均值得： pKa =3.34 3.0 4.0 HL L [HL] lg lg [L] A A A A ? ? ? ? ? ? ? ? L HL lg pH A A A A ? ? 曲线 L HL a 3.32 lg 0 pH p A A A A K ? ? ? ? ? 时 3.32 Analytical Chemistry 分析化学 不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束单色 光 ( λ 1 和 λ 2 ) ；以参比波长 λ 1 处的吸光度 A λ1 作为参比，来消除干 扰。在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试样时显示出很大的 优越性。灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法 有所提高。 Δ Ａ ＝ A λ2 － A λ1 ＝（ ε λ2 － ε λ1 ) b c 两波长处测得的吸光度差值 Δ Ａ 与待测组分浓度成正比。 ε λ1 和 ε λ2 分别表示待测组分在 λ 1 和 λ 2 处的摩尔吸光系数。 五、双波长分光光度法 Analytical Chemistry 分析化学 双波长分光光度法消除干扰示意图 在 ? 2 ， A ? 2 = A x 2 + A y 2 在 ? 1 ， A ? 1 = A x 1 + A y 1 ? A = A ? 2 - A ? 1 = A x 2 + A y 2 – ( A x 1 + A y 1 ) = A x 2 – A x 1 = ? A x A y 2 ＝ A y 1 ? A x =( ? x 2 － ? x 1 ) bc x 消除了 Y 干扰 X 被测 Y 干扰 ? 2 ? 1 ? 1 ′ A y 1 A x 1 A y 2 A x 2 A ? /nm 270nm X －苯酚 Y － 2,4,6 －三氯苯酚 Analytical Chemistry 分析化学 双波长分光光度法消除浑浊背景的干扰 A ? ? 2 ? 1 y A x 2 A x 1 A y 1 A y 2 在 ? 2 ， A ? 2 = A x 2 + A y 2 在 ? 1 ， A ? 1 = A x 1 + A y 1 ? A = A ? 2 - A ? 1 = A x 2 + A y 2 – ( A x 1 + A y 1 ) = ( A x 2 – A x 1 ) +( A y 2 - A y 1 ) 当 A x 2 – A x 1 A y 2 - A y 1 时 ? A = A x 2 – A x 1 与背景无关 ? nm I 散 射 光 Analytical Chemistry 分析化学 10.6 吸光光度法的应用 Analytical Chemistry 分析化学 1. 单组分的测定 通常采用 A-C 标准曲线法定量测定。 2. 多组分的同时测定 ⑴若各组分的吸收曲线互不重叠，则 可在各自最大吸收波长处分别进行测定。 这本质上与单组分测定没有区别。 ⑵若各组分的吸收曲线互有重叠，则 可根据吸光度的加合性求解联立方程组得 出各组分的含量。 A λ1 = ε aλ1 bc a ＋ ε bλ1 bc b A λ2 = ε aλ2 bc a ＋ ε bλ2 bc b 一、普通分光光度法 Analytical Chemistry 分析化学 普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测组分 含量较高时，将产生较大的误差 , 需采用示差法。 即提高入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的 标准溶液 作参比溶液。 设：待测溶液浓度为 c x ，标准溶液浓度为 c s ( c s c x ) 。则 A x= εb c x A s = εb c s Δ Ａ ＝ Ａ x － Ａ s