Ptch、β-catenin蛋白在胰腺癌组织中的表达及意义.docVIP

精品论文 参考文献 Ptch、β-catenin蛋白在胰腺癌组织中的表达及意义 翟宏鹏1 马凯2 张春阳1 宦大为3 李金晖1 (1沈阳医学院附属中心医院普外三科 110024) (2中国医科大学附属盛京医院 110003) (3沈阳医学院附属中心医院病理科 110024) 【摘要】目的 研究patched(Ptch)、beta;-联蛋白（beta;-catenin）在胰腺癌组织表达的意义，及其与临床病理参数的关系。方法 选取胰腺癌标本34例、正常胰腺标本16例，应用免疫组化法检测Ptch和beta;-catenin的表达情况。结果 Ptch在胰腺癌的高表达与病理分级（P=0.009）密切相关。beta;-catenin在胰腺癌中的异常高表达与淋巴结转移（P=0.030）、TNM分期（P=0.039）密切相关。beta;-catenin蛋白异常表达与Ptch蛋白阳性表达相关（r=0.443，P＜0.05）。结论 Ptch在胰腺癌分化中有重要作用。beta;-catenin在胰腺癌发生和进展中有重要作用，促进癌细胞转移和浸润。 【关键词】胰腺癌 免疫组织化学 【中图分类号】R730.2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）27-0165-01 胰腺癌死亡率逐年上升，已居恶性肿瘤死亡率的第四位[1]。胰腺癌预后极差，5年生存率不超过6%[2]。本研究通过免疫组织化学方法检测Ptch、beta;-catenin蛋白在胰腺癌组织和正常胰腺组织中的表达情况，并探讨其差异与临床病理参数的关系及两者的相关性旨在为胰腺癌的临床诊断、治疗及预后提供依据。 1 资料与方法 1.1 一般资料 收集我院2008年2月—2010年9月胰十二指肠切除及胰腺体尾部切除手术标本50例：其中胰腺癌34例，男20例，女14例；手术后经病理证实的正常胰腺组织16例，男10例，女6例。患者年龄38~73岁，平均年龄（58.2plusmn;6.7）岁。 所有患者术前均未进行化疗或放疗。按组织学进行分级，高分化胰腺癌12例，中、低分化胰腺癌22例。按国际抗癌联盟（UICC）胰腺癌（2002年）TNM分期标准进行分期，Ⅰ、Ⅱ期19例，Ⅲ、Ⅳ期15例。按有无淋巴结转移分类，无淋巴结转移18例，有淋巴结转移16例。所有肿瘤标本均经病理诊断证实。 1.2 试剂与方法 山羊抗人Ptch多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司；小鼠抗人beta;-catenin单克隆抗体、S-P免疫组化试剂盒、抗原修复液和DAB显色试剂盒均购自中国福州迈新生物技术开发有限公司。免疫组织化学检测采用S-P染色方法，具体操作步骤按产品试剂盒说明书经行。一抗山羊抗人Ptch多克隆抗体工作浓度为1:5，一抗小鼠抗人beta;-catenin单克隆抗体工作浓度为1:1。用已知的乳腺癌阳性切片作为阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。在细胞质、细胞膜呈现黄色至棕黄色颗粒的为阳性细胞标志， 1.3 结果判定及计数 DAB显色后，光镜下每张切片随机选择5个高倍镜视野（times;400），每个视野随机计数500个胰腺癌细胞。Ptch蛋白阳性结果判定在细胞质、细胞膜呈现黄色至棕黄色颗粒的为阳性计数标本。将阳性细胞按其数量及显色强度分为3级：阴性（-），阳性细胞数lt;10%，显色强度为淡黄色或仅个别细胞呈黄至棕黄色染色；阳性（+），阳性细胞数为10%～50%，阳性细胞数及显色强度介于阴性与强阳性之间；强阳性（++），阳性细胞数gt;50%，多数细胞呈黄至棕黄色染色。beta;-catenin蛋白阳性结果判断标准细胞膜上有棕黄色颗粒为阳性计数标本，异常表达，细胞膜基本消失，细胞浆或核异质性表达；正常表达，保留细胞膜。 1.4 统计学方法 采用SPSS 13.0软件处理，计数资料比较用chi;2检验或Fisher确切概率法，Spearman等级相关分析Ptch和beta;-catenin之间的关联程度，以Plt;0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 胰腺癌和正常胰腺组织Ptch和beta;-catenin表达情况比较 胰腺癌组Ptch主要表现为细胞质中强阳性表达，细胞膜上也有表达，呈棕黄色或棕褐色，阳性表达率为58.8%（20/34），beta;-catenin在胰腺癌中异常表达，主要表现为细胞膜表达消失而呈在胞浆内聚集表达，阳性表达率