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Rh血型的实验室鉴定
精品论文 参考文献 Rh血型的实验室鉴定 黑龙江省双城市人民医院 黑龙江双城 150100 【摘 要】目的 探究Rh血型系统抗原及抗体的检测方式。方法 采集血液样本,在实验室条件下进行分析检验,对其结果进行解读分析,总结其临床应用意义。结论 定型用抗血清试剂严格注意反应相的特异性、新和力和操作方法。注意受检细胞是否存在变异性,是否存在两群红细胞。受检细胞需以盐水洗涤和悬浮,避免血清蛋白的干扰。 【关键词】检测;Rh血型系统;抗原抗体 0引言 常规情况下,红细胞只作Rho(D)定型,当有特殊理由时,例如家系调查、父权鉴定、产前检查时需要确定纯合子或杂合子,配血试验中发现有不规则抗体存在等情况下,才需要做Rh血型抗原全部表型定型。鉴定Rh血型抗原有不同的技术,主要按定型试剂的性质而确定,因此在作血型鉴定时,应对所用的定型试剂有全面的了解,才能避免假阳性和假阴性,正确地获得定型结果。 1常见的抗D试剂的种类和相应的定型技术 1.1玻片或快速试验用的抗D血清 这类试剂常用含IgG抗D抗体的血清为原料[1],用高蛋白稀释液配制而成,稀释液中一般含有高分子量的物质,如聚乙烯吡咯酮、葡聚糖等作为添加剂,有以增进和加强D抗原红细胞的凝集作用。使用这类定型试剂反应快,但如病人的红细胞已被IgG致敏,或血清中含高效价自身抗体时,则可能出现假阳性反应。因此,需用免疫学惰性的试剂作平行的对照试验,以免出现假阳性。通常使用配制这种抗D试剂的高蛋白稀释液作惰性试剂进行对照试验,效果最为理想。 1.2盐水法试验用的抗D血清 这类定型试剂通常不含增进凝集反应的增效剂,能够对有IgG致敏的红细胞成功的定型而不产生假阳性。作定型试验时必须使用充分洗涤的红细胞悬液。为了防止自身抗体或引起缗钱状因素的干扰,试验时仍需要有可检出自身凝集反应的对照系统,采用6%~8%的牛白蛋白溶液作为对照试剂比较理想。 止前市场供应的盐水反应性的Rh定型血清有两种类型,一种是用含有IgM抗体的血清制成,另一种是用化学改性的IgG抗体制成,应注意二者的差别。 1.3酶或间接抗球蛋白试验用的抗D血清 这类定型试剂通常用含有IgG抗体的血清制成,但不含高蛋白稀释剂[2],因此必须采用酶法或抗球蛋白试验进行定型试验。红细胞有IgG致敏时,定型会有假阳性产生,因此应有对照系统,可用生理盐水或6%~8%的牛白蛋白液作对照试剂。该类定型试剂有利于检出DU型等弱抗原或变异型。但酶试剂和抗球蛋白试剂的质量十分重要,定型操作也比较费时。 2 DU型鉴定 DU型红细胞带有D抗原,但不被某些抗D血清凝集。盐水反应的抗D试剂检查DU型红细胞通常出现阴性结果,必须用间接抗坏蛋白试验,才能证明为D变异型。 试验系统中,必须有对照管,如果对照试验管阳性,则不能对DU型作用有效的解释;如果试验为阴性,则应加入已知IgG致敏红细胞,并再次了心后,结果仍为阴性者,方可定为阴性。如果受试细胞的直接抗球蛋白试验为阳性,则无法作DU鉴定试验。 3 直接抗球蛋白试验阳性红细胞的D定型 自身免疫溶血的病人和新生儿溶血病患儿的红细胞,常被免疫球蛋白所致敏,因此用含有高蛋白稀释剂的定型试剂以及用间接抗球蛋白试验定型时,无法正确进行,此时通常可用盐水反应性试剂血清作定型试验。但如果致敏的免疫球蛋白太多,使细胞表面抗原位点都被占据,处于“封闭”状态,此时任何定型试剂都无法正确试验。在这种情况下,可采用45℃下加热放散法或其它不损伤红细胞膜的抗体放散法,将致敏在红细胞膜上的免疫球蛋白放散后,再作定型试验,才能有正确的定型结果[3]。 4 其临床意义 Rh抗体的免疫球蛋白性质 大部份Rh值抗体属IgG,与盐水悬浮的Rh阳性红细胞不起凝集反应,但用高分子介质(如牛白蛋白)、酶试验或间接抗球蛋白试验可以测出抗原。少数抗D血清含有IgM抗体,但一般总伴有IgG抗体,这些IgG的抗D血清能凝集盐水悬浮的D抗原阳性红细胞。IgA性质的抗D十分罕见,一般只是混合在IgG抗体的血清中。在免疫反应的早期,通常认为最先出现的是IgM抗体,随之为IgG性质的抗体。IgG抗体分子主要为IgG 1和IgG3亚类,较少为 IgG2和 IgG4亚类。Rh抗体的产生 Rh抗体主要通过输血或妊娠免疫而产生,一般在初次免疫后2~6个月内出现。对Rh0(D)初次免疫的人,经再次免疫后,在3周内抗体浓度可达最高峰。大约1/3的Rh阴性的人,受Rh阳性抗原免疫后,不产生抗D,这种人称为非反应者。 参考文献: [1] 黎添华,龙雪芳.稀有血型RH Rh(D)阴性冰冻红细胞制备与质量检测分析 [J].中医临床研究,2014,21:137-138
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