HPLC-MS法检测人泪液中葡萄糖含量方法学研究.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC-MS法检测人泪液中葡萄糖含量方法学研究 袁艳娟1 何学军2 邵卿1 刘晶1 乔红群1 （1南京工业大学/江苏省药物研究所/江苏省药物安全性评价中心 江苏南京 210009) ( 2南京工业大学 江苏南京 210009） 【摘要】 建立了人泪液中葡萄糖含量的HPLC-MS测定方法。色谱柱为Waters Xbridge Amind 柱（2.1times;100mm，3.5micro;m），流动相为0.1%甲酸-乙腈（15：85），柱温：20℃；流速：0.2ml/min, 进样量20mu;l。葡萄糖浓度在1mu;g/ml～40mu;g/ml范围内与峰面积有良好的线性关系，定量限为1mu;g/ml。采用液质联用法检测人泪液中葡萄糖含量，该法专属性强，方法简单，结果可靠。 【关键词】 泪液 葡萄糖 HPLC-MS 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）08-0118-02 Determination of the concentration of Tear Glucose by HPLC-MS YUAN Yan-juan1, HE Xue-jun2 , SHAO Qin1,LIU Jin1 , QIAO Hong-qun*1 ( 1. Nanjing University Of Technology Jiangsu Provincial Institute of Material Medica，JiangSu Center For Safety Evaluation Of Drugs Nanjing 210009 China 2. Nanjing University Of Technology Nanjing 210009 China, ) 【Abstract】 Determination of the concentration of tear glucose was established by HPLC-MS. Waters Xbridge Amind （2.1times;100mm，3.5micro;m）column was used, 0.1% Formic acid - acetonitrile as mobile phase, column temperature: 20 ℃; flow rate: 0.2ml/min; injection volume 20mu;l. Peak area of glucose was in a good linear correlation with injection quanlity within the range of 1mu;g/ml～40mu;g/ml。The limit of quantification was 1mu;g/ml. This method used for the determination of the concentration of tear glucose was specificity , simple and reliable. 【Keywords】Tear Glucose HPLC-MS 糖尿病是一组内分泌代谢疾病，以高血糖为其主要标志。可伴发各种慢性并发症。糖尿病患者在持续高血糖或血糖不稳定状态下可导致其唾液、泪液等体液中糖含量发生改变。目前临床上通常把检测血糖做为诊断糖屎病的方法之一，但血糖易受多种因素影响，且糖尿病患者的血糖水平极不稳定。而泪糖测定在统一采集方法的前提下，影响因素较少，并且有敏感性高、无损伤、标本来源方便、操作简单及泪糖含量较恒定等优点[1]。正常人泪液中含有一定量的葡萄糖，为0.14士0.07 mmol/L，糖尿病人泪糖含量较正常人高为0.32士0.18 mmol/L即在25mu;g/ml以上[2]。 目前检测泪糖的方法有多种，　March等[3]首先报道研制出可用于临床的用于检测泪糖的角膜接触镜,通过角膜接触镜上荧光的强弱来了解泪糖的情况,当泪糖升高时,角膜接触镜上的荧光信号会增强，但是它并不能反应泪糖的具体数值。Badugu等[4]研制出一种无色的角膜接触镜, 当含有荧光团的硼酸与泪液中的葡萄糖发生反应时,可出现荧光反应,通过分光光度计测量吸收值可以了解泪液中葡萄糖含量。但是这些方法都比较复杂，本文探讨了采用HPLC-MS法检测人泪液中葡萄糖含量的方法。 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 Waters Quatt