HPLC法测定亚胺培南母核对映异构体的含量.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC法测定亚胺培南母核对映异构体的含量 朱镇星1 陈少亭1 匡霞霞2 章玉华3 江伟军1 屈春红1 唐鹤1（通讯作者） （1浙江海翔药业股份有限公司 台州椒江 317016） （2浙江华海药业股份有限公司 台州临海 317000） （3浙江海翔川南药业有限公司 台州临海 317000） 【摘要】目的 建立一种专属性好、灵敏度高、快速、准确的高效液相色谱手性分析亚胺培南母核对映异构体含量的分析方法。方法　以乙酸乙酯－正己烷－三氟乙酸为流动相，用手性柱CHIRALPAK IA（4.6mmtimes;250mm，5mu;m）成功分离亚胺培南母核对映异构体。结果　流动相为乙酸乙酯：正己烷：三氟乙酸（60：40：0.1，V/V/V），检测波长为270nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，进样量为10mu;l，样品浓度为1.0mg/ml,用外标法计算为方法时，方法系统精密度RSD%为0.41%(n=6)亚胺培南母核及对映异构体的分离度为3.38，实现基线分离；亚胺培南母核异构体在0.5mu;g/ml～5mu;g/ml（相当样品量0.05%～0.5%）范围内呈良好，相关系数r＝0.9996；准确度回收率范围为99.2%～105.2%；最小检测量为0.488mu;g/ml(相当样品量0.05%)，重现性RSD%：0.07%（n=6）。结论　本方法对亚胺培南母核对映异构体定量分析专属性好，灵敏度高，精密度和准确度高，结果可靠。 【关键词】 亚胺培南母核对映异构体 高效液相色谱法 手性柱色谱柱 亚胺培南 验证 【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）35-0089-02 亚胺培南母核是合成亚胺培南的关键原料，亚胺培南[1]一种新型的广谱beta;内酰胺碳青霉素烯抗生素。临床上用于治疗血液病合并感染、胰腺炎、下呼吸道感染等。亚胺培南的母核为L型，所以必须有效的控制亚胺培南母核对映异构体（D型）的含量。目前对亚胺培南母核对映异构体拆分的报道比较少，本文采用目前广泛应用的多糖衍生物键合型色谱柱进行拆分，通过用CHIRALPAK IA手性柱成功分离了亚胺培南母核对映体并对检测方法进行优化和验证。 1 仪器与试药 1.1仪器 高效液相色谱仪：（日本岛津公司）LC-20A高效液相色谱仪，SPD-20A紫外检测器，SIL20A自动进样器，配有labsolutions工作站；手性色谱柱：(日本大赛路公司)CHIRALPAK IA 4.6mmtimes;250mm 5mu;m;瑞士梅特勒XS-205型电子分析天平。 1.2试药 乙酸乙酯（Burdic amp; Jackson公司生产色谱级）；正己烷（MERCK公司生产 色谱级）；三氟乙酸（MERCK公司生产色谱级）；亚胺培南母核样品：浙江海翔川南药业有限公司；亚胺培南母核对映异构体标准品：浙江海翔川南药业有限公司 2 方法 2.1色谱条件 色谱柱：CHIRALPAK IA手性色谱柱；流动相：乙酸乙酯：正己烷：三氟乙酸（60：40：0.1，V/V/V）；检测波长：270nm；流速为1.0ml/min，柱温为30℃，进样量为10mu;l，样品浓度为1.0mg/ml，外标法计算异构体含量。 2.2溶液制备 样品溶液：取样品10mg，精密称定于10ml容量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，摇匀。 分离度溶液：取样品和亚胺培南母核对映异构体各25mg，精密称定于100ml容量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，摇匀。对照溶液：取亚胺培南母核对映异构体10mg，精密称定于100ml容量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，摇匀;移取上溶液2.0ml，于100ml容量瓶，稀释至刻度，摇匀。 3 结果与讨论 3.1色谱条件选择 3.1.1波长的选择 亚胺培南母核在197nm和270nm处有最大吸收，考虑到溶剂的干扰所以选择270nm。 3.1.2流动相选择 根据产品的理化性质，易溶于乙腈，溶于乙酸乙酯，几乎不溶于正己烷，且在醇和水的溶剂相中不稳定，所以选择乙酸乙酯和正己烷混合当流动相。因为该样品显弱酸性不加三氟乙酸进样不出峰，所以需要添加酸性添加剂三氟乙酸0.1%。 3.2优化 通过调节流动相中乙酸乙酯的比例选择最佳的分离效果的色谱条件 将乙酸乙酯的比例由40%增加至80%,亚胺培南母核对映异构体的时间由24.002min缩短至4.1min，分离度由10.28减