大鼠骨髓间充质干细胞的分离方法和培养.docVIP

精品论文 参考文献 大鼠骨髓间充质干细胞的分离方法和培养 邹瑾1 李雅2 尹进3 　　（1湖南科技职业学院 湖南 长沙 410014） 　　（2湖南中医药大学 湖南 长沙 410004） 　　（3湖南疾病预防控制中心 湖南 长沙 410007） 　　【摘要】 目的：探索在体外培养和纯化SD大鼠的骨髓间充质干细胞（BMSCs）的方法。方法：采用改良全骨髓贴壁方法，分离和纯化3～4周的大鼠BMSCs，镜下连续观察细胞的形态变化。流式细胞仪鉴定其表面抗原CD11b、CD45和CD90的表达情况。结果：原代培养的细胞呈圆形和梭形等，24小时后大部分细胞均贴壁。8～10天可达80%～90%融合，纯化后传代周期为6～8天。流式细胞术鉴定表明CD11b和CD45阴性，CD90阳性。结论： 改良全骨髓贴壁法可有效分离培养大鼠的骨髓间充质干细胞，是一种比较理想的分离培养方法。 　　【关键词】骨髓间充质干细胞 细胞培养 大鼠 　　【中图分类号】R730.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）13-0026-02 　　 Rat bone marrow mesenchymal stem cellslsquo;s separation methods and to cultivate Zou Jin. Hunan Vocational College of Science and Technology, Hursquo;nan Province, Changsha 410014, China; Li Ya. Hursquo;nan University of Chinese Medicine, Hunan Province, Changsha 410004, China; Yin Jin. The Centers for Disease Control and Prevention of Hursquo;nan, Hursquo;nan Province, Changsha 410007, China 　　【Abstract】Objective To explore the in vitro culture and purification of SD rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) method. Methods Using improved the whole bone marrow adherent method, separation and purification of rat (for 3 ～ 4 weeks )of BMSCs, microscopically continuous observation of cell morphology change. To identification cells surface antigen CD11b, CD45 and CD90 expression using flow cytometry. Results The original generation of cultured cells is circular and spindle, after 24 hours, most of the cells are attached. 8 ～ 10 days later, the fusion of up to 80% ～ 90%. After purification，extend the period is 6 ～ 8 days. Using flow cytometry assay, CD11b and CD45 were negative, CD90 is positive. Conclusions Improved the whole bone marrow adherent method, which can effectively the isolation and culture of rat bone marrow mesenchymal stem cells, is an ideal method of cultivation. 　　【Key words】Bone marrow mesenchymal stem cells; Cell culture; The rat 　　骨髓间充质干细胞是中胚层来源的干细胞，是具有多向分化潜能的成体干细胞之一[1]。在不同诱导条件下，可以分化为成骨细胞、肌细胞和脂肪细胞，还可以跨胚层分化为神经元、肝细胞和内皮细胞等，是目前组织工