稀土对肿瘤细胞生长和其基质金属蛋白酶表达影响.pdf

天津医科大学医学检验学系 物。在肿瘤的临床诊断和治疗上所应用的放射性核素一半是稀土，其原因是由 于稀土对肿瘤的高亲和力，这提示稀土与肿瘤的关系密切。稀土能够抑制肿瘤 细胞生长，已被许多学者的研究证实。纪云晶等“”运用体内外抑瘤实验，抗诱 变实验和抗肿瘤免疫等实验和流行病学调查证实了非放射性轻稀土化合物具有 一定的抑癌和防癌作用。倪瑾等“”发现稀土金属配合物能提高肿瘤细胞对辐射 的敏感性。车军等。”取人肝癌细胞体外37℃恒温培养24小时，加入不同浓度的 稀土化合物，继续培养36小时，用0．1％台盼蓝活体染色后进行细胞计数，通过 细胞生长抑制率、半数抑制浓度，考察了几种稀土化合物对人肝癌细胞的抑制 效应。结果表明，几种稀土化合物对人肝癌细胞均有明显的抑制作用。但是， 关于稀土抑癌作用的机制，我们尚知之甚少，虽有研究推测可能是通过使细胞 恶性度降低，分化程度升高，增加抑癌基因表达水平实现的n“；亦有研究显示 稀土可抑制肿瘤细胞增殖和DNA合成“”。 因而，为了研究稀土对肿瘤侵袭和转移的影响，深入探讨稀土抑癌机制。 本课题以MMPs为研究靶点，采用分子生物学和细胞生物学的方法分别从细胞、 蛋白和基因三水平观察稀土对不同的肿瘤细胞株的影响，首次探讨了稀土对肿 瘤细胞侵袭和转移的生理生化机制。 第8页 天津医科大学医学检验学系 2。实验方案及方法 稀土对肿瘤细胞生长及其基质金属蛋白酶表达的影响 萨有■甏 [i；_]匡三巫习[三卫 O O O [匦P匪囹E囝 ◇ O O D O[习 E三习E三三] 上J， o o丐=[图 ，mu。”…e一”-“一-*“一* 2．1材料 人膀胱癌Ⅲ细胞株，引自天津市泌尿外科研究所；人纤维肉瘤H，r-1080 细胞株，引白天津市肿瘤医院中心实验室；人骨肉瘤细胞株MG．63，引自天津 医科大学内分泌研究所二室；成骨细胞，取自新生1日龄wistar鼠，引白天津 自包头稀土研究院，氯化镧(IJaa3)购自Sigma公司。 第9页 天津医科大学医学检验学系 2．2仪器和试剂 2．21仪器 Multiskan Ms酶标仪 芬兰L丑b．svstems DNAlllemal 480扩增仪 美国PerkinElmerOems cycler cont讧uge17RS台式冷冻离心机 德国Heraeus 德国Heraeus SuperafI|ge22高速冷冻离心机 uVP凝胶图像分析系统 UVP公司，英国 BIO．黜、D微型凝胶电泳系统 BIO-RAD。美国 紫外分光光度计 BeckmanDU嘧640 speccrotometer，美国 DGsY电热恒温水浴锅 北京市医疗设备厂意成公司 电子天平 上海天平仪器厂 PH计Orion伽 美国 恒温空气摇床 武汉科学仪器厂 垂直板蛋白电泳仪(MINl2．D) 武汉科学仪器厂 电转移系统 BIO．R_^D