角果木Mn-SOD基因分离及其在酵母中的功能鉴定.pdfVIP

热带作物学报 2014，35(10)：1963—1968 ChineseJournalofTr0picalCro 角果木Mn—SOD基因分离及其 在酵母中的功能鉴定 王鹤鸣，牛晓磊，臧 剑，高志亮，肖晓蓉 ，林道哲，陈银华 海霉南南省省囊热带带生生物资资源源可荨持持续续利用用重重蓑点实实验验萎室海碍南海佴口570228 摘 要 为明确抗氧化系统在植物抵御盐胁迫 中的作用 ．采用 RT—PCR的方法分离角果木抗氧化酶相关基 因 Mn—SOD．采用酶切连接法构建酵母表达载体 pYES2M／nSOD．获得含有重组质粒 的酵母菌 INVScI(pYES2／ MnSOD)能有效表达 MnSOD特异蛋 白带 。高浓度盐胁迫筛选结果表明，Mn—SOD基 因在酵母 中的表达能明显提 高酵母菌 INVSCI的耐盐性 关键词 角果木 ；耐盐性 ；Mn—SOD基 因；酵母菌 中图分类号 Q943 文献标识码 A Isolation 0fMn-SOD ofCer／opstagaland ItsExpression in Yeast WANG Heming，NIU Xiaolei，ZANG Jian，GA0 Zhiliang XIAO Xiaorong．LIN Daozhe．CHEN Yinhua CollegeofAgronomy,HainanUniversity／HainanKeyLaboratoryforSustainable UtilizationofTropicalBioresources，Haikou,Hainan570228,China Abstract To studythefunction ofantioxidantsystem againstsaltstress，theMnSOD genefrom Ceriopstagalwas cloned by RT—PCR．The Mn—SOD genewasinserted into pYES2 and transformed into yeastcells．The MnSOD proteinwassuccessfully expressed inyeastbySDSanalysis．High concentration ofsaltstresstestsindicated thatexpressionofMn—SoD geneinyeastcouldsignificantlyimprovethesalttoleranceofyeaststrainINVScI． Key words Ceriopstagal；Salttolerance；Mn—SOD；Yeast doi 10．39690．issn．1000—2561．2014．10．014 正常生长条件下 ．植物体内活性氧产量较低 ． 剂、病毒感染、逆境胁迫等伤害时，Mn—SOD含量 并且处于一种相对平衡状态 ．当环境条件发生改变 及酶活性会 明显增高，起到保护DNA、降低细胞 时．这种动态平衡被打破 。活性氧大量生成[1]。活 癌变机率的作用 ：过量表达Mn—SOD可 以使植株 性氧的大量爆发会导致核酸 的损伤、蛋 白质氧化、 在受到氧化胁迫时提高其抗逆性6[1 脂质过氧化 ．从而引起许多细胞丧失功能圜。在长 角果木属于红树科角果木属典型的非泌盐性红 期进化过程中．植物细胞往往会进化出先进 的防御 树植物 ．具有很强的耐盐性7[1。在长期 的进化中形 系统对抗活性氧，包括酶促和非酶促系统3[1。超氧 成了 自己独特的耐盐机制 ．当受到盐胁迫时．其体 化物歧化酶 (SODs)是细胞对活性氧 防御体系的第 内超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、过 一 道防线；这些酶迅速将超氧阴离子 (O)和水 (H：