拮抗放线菌06-6的筛选鉴定及其发酵条件优化.pdfVIP

江苏农业科学 2014年第42卷第6期 -—·—107--—— 郝永丽，宗兆锋，高 博，等．拮抗放线菌06—6的筛选鉴定及其发酵条件优化[J]．江苏农业科学，2014，42(6)：107—109 拮抗放线菌O6—6的筛选鉴定及其发酵条件优化 郝永丽 ，宗兆锋 ，高 博 ，胡海波 ，曲宝茹 (1．内蒙古自治区赤峰市农牧科学研究院，内蒙古赤峰024031； 2．西北农林科技大学植保学院／陕西省农业分子生物学重点实验室，陕西咸阳712100) 摘要：从采集的土样中分离出拮抗放线菌，并筛选出对4种靶标菌均具有明显拮抗效果的菌株06—6，对该菌株 进行发酵条件优化及生理生化鉴定，从而确定该菌株的最佳发酵技术参数，通过鉴定初步将其归类为灰红紫类群 (Griseorubroviolaceus)。 关键词：拮抗放线菌；筛选 ；鉴定；发酵条件；优化 中图分类号：Q939．92 文献标志码 ：A 文章编号：1002—1302(2014)06—0107—03 拮抗菌作为一种具有丰富资源的微生物类群，其产生的 至、乾县、户县及山东诸城。 抗生素及其他次生代谢物质在农作物病虫害生物防治方面具 1．1．2 供试病原菌 供试靶标菌由西北农林科技大学微生 有重要作用，是具有使用价值和经济价值的一类微生物，在植 物实验室提供 ，包括番茄灰霉菌 (Botrytiscinerea)、苹果炭疽 物病虫害生物防治中应用前景广 “J。利用拮抗放线菌产生 菌(Colletotrichumgloeosporioides)、西瓜枯萎菌 (Fusariumoxys— 的活性物质进行真菌病害防治，具有周期短、易于研究、便于 porumf．sp．nweum)和粉红聚端孢(Trichotheciumroseum)。 生产、无毒害等优点。本研究旨在从采集的土样中分离筛选 1．2 筛选方法 杀菌力强、抗菌谱广的拮抗放线菌；并对其发酵条件和分类进 1．2．1 菌株的分离与纯化 采集的土壤过筛，研磨后称取 行研究，为优势拮抗放线菌在生物防治中的应用奠定基础。 0．1g样品，制备成不同浓度的稀释液 ]。用移液器吸取特 定稀释浓度的液体 20 ，滴在高氏培养基表面，涂匀。将皿 1 材料与方法 倒置于28℃培养箱中培养，几天后从皿内分离出单菌落，用 1．1 材料 显微镜检纯化 ，保存于G氏斜面中。 1．1．1 土样来源 试验用土壤标本分别采集于陕西商洛、周 1．2．2 拮抗放线菌的筛选 用打孔器将培养好的放线菌菌 苔打成直径5mm的菌饼置于PDA平板中间，3d后将同样大 收稿 日期 ：2013—09—25 小的4种供试病原真菌菌饼对峙接于两侧，2l℃下培养，观 基金项 目：教育部创新团队发展计划 (编号：200558)；国家高等学校 察并测量抑菌圈的大小。将初筛得到的菌株于 SNB培养液 学科创新引智计划 (编号：B07049)。 中振动培养，发酵液离心后取上清液，采用微孔扩散法测定发 作者简介 ：郝永丽(1981一)，女，内蒙古赤峰人，硕士，助理研究员 ，从 酵液及发酵滤液的抑菌活性 ，供试靶标菌为西瓜枯萎菌。 事园艺植物病虫害防治研究。E—mail：yonglihao1981@163．com。 据报道，芽孢杆菌属的一些种类对外界有害因子的抵抗力强， endophytesintheagriculturalcrops[J]．CanadianJournalofMicro— 菌体生长