拮抗细菌EBS05生长曲线及粗提物抑菌活性测定.pdfVIP

澎江学种学 第56~2o15年第3期 囡 文献著录格式 ：李刚，尹志刚，陈振 ，等．拮抗细菌EBS05生长曲线及粗提物抑菌活性测定 [J]．浙江农业科学 ，2015，56 (3)：369—372 DOI： 10．16178／j．issn．0528-9017 拮抗细菌 EBS05生长 曲线及粗提物抑菌活性测定 李 刚 ，尹志刚 ，陈 振 ，郭太忠 (1．信阳市农业科学 院，河南 信 阳 464000；2．河南农业大学 ，河南 郑州 450002；3．鹤壁市农业技术推广中心 ，河南 鹤壁 458030) 摘 要 ：为探明枯草芽孢杆菌 EBS05的生长 曲线及其菌液粗提物的抑菌活性，特开展本试验 。通过测定 D 值 ，初步构建 EBS05的生长 曲线 ；并分别采用盐酸和 40％硫酸铵对发酵液 中的抑菌物质进行沉淀粗提 ；用 对峙培养法测定了粗提物的抑菌活性 ，用生长效率法测定了 EBS05粗提取物对黄瓜灰霉菌、西瓜炭疽菌、黄瓜 枯萎菌、小麦赤霉菌和小麦纹枯菌的抑菌活性 。结果表 明，在 NYD培养液 中培养 72h后 ，EBS05菌体数量最 大 ，此时抑菌活性也最强；用 0．1otol·L 盐酸调节菌液 pH至 2．0，或用 40％硫酸铵都能够有效沉淀 出发酵液 中的抑菌物质 ，且沉淀抑菌活性与发酵原液相当；EBS05粗提物对 l2种植物病原菌均具有一定的抑菌活性 。总 体来看 ，枯草芽孢杆菌 EBS05是一种很有发展前景 的生 防微生物 资源 。 关键词 ：枯草芽孢杆菌；生长曲线 ；粗提物 ；抑菌活性 中图分类号 ：Q939．9 文献标志码 ：A 文章编号 ：0528—9017(2015)03—0369—03 EBS05是从樟树表皮组织中分离筛选得到的一 PDA培养基 。马铃薯 (去皮)200g，葡萄糖 株对多种植物病原菌和烟草花叶病毒有稳定抑制活 20g，水 1L，琼脂 15g。 性 的生防菌株 ，经 16～23SrRNAISR序列分 1．1．2 供试菌种 析鉴定 ，为枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis) 。枯 枯草芽孢杆菌 EBS05；指示菌。小麦 赤霉 菌 草芽孢杆菌在拮抗细菌筛选中比较常见 ，对人畜都 (Gibberella zeae)，小 麦 纹 枯 菌 (Rhizoctonia 比较安全，具有广谱抗菌活性 ，能产生抗生素 、蛋 cerealis)， 小 麦 全 蚀 菌 (Gaeumannomyces 白质类 、酶类 、细菌素等多种生物活性代谢产物。 graminis)，棉花枯萎菌 (Fusariumoxysporumf．sp． 枯草芽孢杆菌可 以耐受各种不 良环境条件 ，所产脂 vasinfectum)， 高 梁 炭 疽 菌 (Colletotrichum 肽类物质对高温、紫外线、蛋 白酶等都有很强耐受 graminicola)，黄瓜灰霉菌 (Botutiscinerea)，黄瓜 力 ，且能够产生对热、紫外线 、电磁辐射等有很强 枯萎菌 (Fusarium oxysporum f．sp．cucumerinum)， 抗性的芽孢。此外 ，部分菌种还能将土壤中的不溶 西瓜炭疽菌 (Colletetrichumorbiculare)，瓜呆腐霉 性磷酸盐转化为可利用态 ，在土壤养分转化 中发挥 菌 (Pythium aphanidermatum )，番 茄 早 疫 菌 重要作用。总体来看 ，枯草芽孢杆菌作为生防微生 (Alternaria solani)，烟 草 赤 星 菌 (Ahernaria 物资源具有研究和开发的巨大潜力 。。为了解液 ahernata)，链格孢菌 (Alternariaspp．)均 由河南 体培养条件下枯草芽孢杆菌 EBS05的生长规律及 农业大学植物病理教研室分离保存 。 其发酵液 中粗提物的抑菌活性 ，更有效地开