大强度力竭运动和PDTC干预对大鼠关节软骨损伤的影响及NF—κB信号途径的探讨.docVIP

大强度力竭运动和PDTC干预对大鼠关节软骨损伤的影响及NF—κB信号途径的探讨 　　摘 要：观察一次大强度力竭运动和补充NF-κB抑制剂——吡咯烷二巯基氨甲酸（PDTC）对大鼠膝关节软骨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、一氧化氮（NO）含量，基质金属蛋白酶-13酶原（pro-MMP-13）和活性MMP-13（active-MMP-13）的影响，探讨过度运动诱导iNOS表达上调并造成软骨损伤的可能机制。将40只SD大鼠随机分为4组：对照组（C组）、给药组（P组）、运动组（E组）、运动+给药组（EP组）。C组给予1 mL生理食盐水腹腔注射，P组给予200 mg/kg PDTC腹腔注射，E组腹腔注射1 mL生理盐水后进行1次大强度力竭运动，EP组腹腔注射PDTC后进行1次力竭运动。实验后2 h，提取关节液，硝酸还原酶法测定NO含量；HE染色观察软骨形态学变化并进行Mankin’s评分；实时荧光定量PCR检测iNOS和MMP-13 mRNA水平；western blot法测定iNOS、pro-MMP-13和active-MMP-13蛋白表达量；凝胶电泳迁移率分析（EMSA）测定NF-κB与DNA结合活性。结果显示与C组比较，E组和EP组Mankin’s评分、关节液NO含量、iNOS和MMP-13 mRNA水平、iNOS和active-MMP-13蛋白水平以及NF-κB与DNA结合活性均非常显著性升高（P0.05）。结果说明一次大强度力竭运动通过NF-κB信号途径介导iNOS表达上调，促进NO大量释放和MMP-13激活，从而参与了软骨损伤的过程。 　　关 键 词：运动医学；力竭运动；核因子-κB；诱导型一氧化氮合酶；软骨；创伤性骨关节炎；大鼠 　　中图分类号：G804.5 文献标志码：A 文章编号：1006-7116（2014）01-0138-07 　　Effects of high intensity exhaustive exercise and PDTC intervention on rat’s 　　articular cartilage injury as well as NF-κB signal pathway exploration 　　HUANG Wei 　　（School of Physical Education，Zhengzhou University，Zhengzhou 450044，China） 　　Abstract： In order to observe the effects of one-time high intensity exhaustive exercise and pyrrolidine dithiocarbamate （PDTC， an NF-κB inhibitor） supplementation on rat’s knee articular cartilage inducible nitric oxide synthase （iNOS）， nitric oxide （NO） content， matrix metalloproteinase-13 proenzyme （pro-MMP-13） and active-MMP-13， so as to probe into a possible mechanism of over-exercise inducing iNOS expression increase and causing cartilage injury， the author divided 40 SD rats randomly into 4 groups， namely， a control group （group C）， a PDTC fed group （group P）， an exercise group （group E）， and an exercise + PDTC fed group （group EP）， injected 1 mL of normal saline into the abdominal cavity of the rats in group C， injected 200 mg/kg of PDTC into the abdominal cavity of the rats in group P， injected 1ml of normal saline into the abdominal cavity of the rats in group E and then let them do an one-time high intensity exhaustive exercise， injected