儿童大叶性肺炎常见病原耐药基因检测及临床分析.pdfVIP

儿童大叶性肺炎肺泡灌洗液病原检测及临床分析 摘 要 目的 了解儿童大叶性肺炎支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid，BALF）肺炎支原体 （mycoplasmalpneumonia，MP）、肺炎链球菌（streptococcuspneumoniae，SP）检出情况，并行相 关耐药基因检测，进一步总结本地区患儿临床特点。 方法 收集大叶性肺炎患儿BALF69 例，采用荧光实时定量PCR （fluorescentreal-timequantitative polymerasechainreaction，FQ-PCR)对上述标本行MP、SP核酸检测。MP 阳性患儿，完善23SrRNA V 区突变位点（A2063G、A2064G、A2063C 及A2063T）检测，位点检测阳性者纳入突变组，检测 阴性者纳入未突变组；SP 阳性患儿，完善大环内酯类抗生素（macrolideantibiotics，MALs）相 关耐药基因（ermB、mefA 及mefE）检测，并行青霉素结合蛋白PBP1A、PBP2B 及PBP2X 基因扩 增测序，根据检测结果分为耐药基因阴性组，耐药基因阳性组，分别比较上述各组患儿的临床资料。 结果 1） 69例大叶性肺炎患儿BALF 中，病原阳性54例，阳性率为78.26%。其中MP 阳性48例（69.57%）， SP 阳性14例（20.29%），MP 合并SP感染8例（11.60%）； 2） 48 例MP 感染性大叶性肺炎患儿共检测到位点突变37 例(77.1%)，突变率依次为：A2063G、 A2064G、A2063C、A2063T。同一患儿体内可同时存在多种突变位点，4 种突变位点同时出现总计6 例（12.5%），A2063G、A2063C 及A2064G 合并存在 10例（20.8%），A2063G 合并A2064G 阳性 6例（12.5%），A2063G 合并A2063T 阳性6例（12.5%），A2063G 合并A2063C 阳性6例（12.5%）； 3） 14例SP感染患儿，ermB、mefA 阳性比例分别为64.3%、14%，两者同时出现2 例（14.3%）， 未检测到mefE 基因； 4） 7 例SP感染患儿存在PBPs 基因变异，其中PBP1A 及PBP2X 同时变异3例，PBP2B 及PBP2X 同时变异3例，PBP1A 及PBP2B 变异 1例，PBP2X 变异最常见（85.7%）。本地区PBP1A 发生氨 基酸置换有THr371Ser、THr371Ala；PBP2B 发生氨基酸置换有THr451Ser、THr451Ala、Ala624Glu； PBP2X 发生氨基酸置换有THr371Arg、Met400Arg； 5） 较MP 未突变组，突变组患儿血清CRP、PCT 及LDH 水平高，合并肺外并发症比例增多，发 热持续时间、住院时间、MALs 应用天数及退热天数延长，且应用甲泼尼龙、IVIG 比例显著增高， 以上差异有统计学意义(P0.05)。 结论 1） 本地区MP 感染性大叶性肺炎患儿，大环内酯类抗生素尤其红霉素耐药突变率高，且感染同一 患儿的支原体存在多种耐药突变位点； 2) SP 感染性大叶性肺炎，针对大环内酯类抗生素耐药基因的阳性率也较高，本地区7 例SP感染 患儿检测到PBPs 变异，其中4 例患儿为高水平β内酰胺类抗生素耐药，3例患儿为低水平耐药； 3) 对于血清CRP、PCT 及LDH 水平显著增高、肺外合并症多、平均发热及住院时间长的大叶性肺 炎患儿应考虑MP 耐药可能。 关键词 肺炎支原体；肺炎链球菌；突变位点；耐药基因；大叶性肺炎；儿童 II 儿童大叶性肺炎常见病原耐药基因检测及临床分析 Abstract Objective ：To understand the detection of bronchoalveolar lavage fluid (BALF) in children with mycoplasmal pneumonia (MP) and streptococcus pneumoniae (SP), and test related resistance genes. Regionalclinicalchar