白藜芦醇预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中Cx43的影响.pdfVIP

摘 要 目的：通过对糖尿病大鼠进行白藜芦醇（Res ）缺血预处理，评价其在心肌缺血再灌注损伤中的作用。 探讨缝隙连接蛋白 43 （Cx43 ）在糖尿病心肌缺血再灌注损伤中扮演的角色和起到的作用。 方法：选择 4-5 月龄，体重为 200～220 g 的清洁级健康成年雄性 SD 大鼠高脂饲料喂养 4 周后一次 性按体重腹腔注射 30 mg/kg 1%链脲佐菌素柠檬酸缓冲液并继续高脂饲料喂养 8 周制作糖尿病模型。 随机将 30 只糖尿病大鼠分为 3 组（n=10 ）：糖尿病假手术组（Sham 组），糖尿病心肌缺血再灌注 组(MIR 组)和糖尿病心肌缺血再灌注+ 白藜芦醇组（MIR+Res 组）。取 10 只非糖尿病大鼠作为非糖 尿病心肌缺血再灌注+ 白藜芦醇组(N+Res 组) 。采用结扎大鼠心脏冠状动脉左前降支30 min，恢复血 流灌注 120 min 的方法制作心肌缺血再灌注损伤模型。MIR+Res 、N+Res 组于缺血再灌注模型建立 前 7 天每日一次按体重腹腔注射 15 mg/kg 二甲基亚砜(DMSO)与磷酸缓冲液（PBS ）混合液稀释的白 藜芦醇。Sham、MIR 组不注射白藜芦醇，注射等量 DMSO 与 PBS 混合液。于再灌注 120 min 时腹 主动脉取血，取心脏组织。采用全自动血生化仪测定血清中乳酸脱氢酶（LDH ）和肌酸激酶同工酶 （CK-MB ）浓度；采用酶联免疫吸附法（ELISA ）测定血清肿瘤坏死因子-α （TNF-α ）和白介素-6 （IL-6 ）的浓度；采用硫代巴比妥酸法（TCA ）测定心肌丙二醛（MDA ）含量；采用ELISA 法测定 心肌活性氧（ROS ）含量；采用黄嘌呤氧化酶法（XOD ）测定心肌超氧化物歧化酶（SOD ）含量； HE 染色后观察心肌组织病理学改变；采用免疫组织化学法 （IHC ）检测心肌 Cx43 含量；采用 Western blot 法测定心肌 Cx43 表达。 结果：Sham 组心肌组织结构完整，肌原纤维排列整齐，几乎无炎症细胞浸润，胞浆内线粒体丰富。 MIR 组心肌组织结构紊乱，肌原纤维溶解，大量炎症细胞浸润，胞浆内线粒体少见。MIR+Res 、N+Res 组细胞水肿及心肌结构紊乱程度较 MIR 组明显减轻，可见少量炎性细胞浸润。其中，N+Res 组病理 学损伤较 MIR+Res 组轻。与 MIR 组比较，MIR+Res 组的 CK-MB、LDH 、TNF-α、IL-6 等心肌损伤 标志物及炎性因子浓度降低，MDA 和 ROS 含量降低，SOD 含量增高、Cx43 表达上升（均P ＜0. 05 ）。 结论：白藜芦醇缺血预处理能减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤，其保护机制可能与Cx43 有关。 关键词：白藜芦醇；缝隙连接蛋白43 ；缺血预处理；糖尿病；心肌缺血再灌注 I Abstract Objective :Resveratrol(Res) ischemic preconditioning was performed on diabetic rats to evaluate its effect in myocardial ischemia reperfusion injury, and to explore the role and effect of connexin43(Cx43) in resvera