N - 乙酰半胱氨酸对肺纤维化大鼠氧化与抗氧化系统影响的研究.docVIP

精品论文 参考文献 N - 乙酰半胱氨酸对肺纤维化大鼠氧化与抗氧化系统影响的研究 何雪梅(深圳市沙河医院 广东深圳 518053) 【摘要】 目的　探讨N-乙酰半胱氨酸对肺纤维化大鼠氧化/抗氧化系统的影响。方法　将大鼠随机分成：正常对照组、模型组、阳性药物(N-乙酰半胱氨酸组)高、低剂量组，造模第7天后取血浆及肺泡灌洗液(BALF) ，检测还原型谷胱甘肽（GSH）含量及测定血清超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果　肺纤维化模型组大鼠BALF和血清中GSH含量及SOD水平的显著下降，高、低剂量NAC组血浆中GSH含量较模型组显著升高（Plt;0.05或Plt;0.01），而用高、低剂量NAC干预治疗后，与模型组比较，BALF和血清中SOD水平均有显著性升高（Plt;0.05或Plt;0.01），且其作用呈一定的剂量依赖关系。结论　N-乙酰半胱氨酸对肺纤维化大鼠急性肺损伤有一定的保护作用，且其保护作用可能与抑制自由基的产生，减少脂质过氧化有关。 【关键词】 N - 乙酰半胱氨酸 肺纤维化　还原型谷胱甘肽　超氧化物歧化酶 【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）15-0022-02 特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF )是一种原因不明的、组织学表现为普通型间质性肺炎(usual interstitial pnenmonia,UIP) 弥漫性进行性肺实质损害和肺纤维化[1]。其中氧自由基(oxygen free radical OFR )对IPF形成的促进作用贯穿整个过程。近年来，OFR在IPF中的损伤作用引起了广泛的注意，而且临床予以抗氧化治疗已取得了显著疗效。本实验通过建立肺纤维化大鼠气道炎症模型，探讨N-乙酰半胱氨酸对于肺纤维化大鼠气道氧化与抗氧化系统影响，为该药物治疗特发性肺纤维化提供临床依据。 1 材料 1.1 实验动物 SPF级雄性SD系大鼠，体重（200plusmn;20）g，由广东省医学实验动物中心提供，许可证号SCXK（粤）2008-0020。 1.2 药品及试剂 乙酰半胱氨酸颗粒（NAC，由广东百奥药业有限公司生产，生产批号；谷胱甘肽（GSH）测定试剂盒（生产批号、总超氧化物歧化酶（T-SOD）测试盒（生产批号均购自南京建成生物工程研究所。 1.3 主要实验仪器 岛津UV-754型紫外可见分光光度计；SANYO医用低温箱，大连三洋冷链有限公司产品；GL-20G-Ⅱ型高速冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂产品；微量移液器，上海求精生化试剂仪器有限公司生产；BS224S电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司产品；恒温水浴箱，上海衡平仪器仪表厂生产。 2 实验方法 2.1 动物分组、造模及给药方法 取SD雄性大鼠40只，实验前适应性饲养7d后开始实验，按体重随机分为正常对照组、模型组、阳性药物(N-乙酰半胱氨酸组)高、低剂量组，共4组，每组10只。麻醉动物后，经颈正中切口行气管内插管，按5mg/kg注入博莱霉素A5制作肺纤维化模型；对照组气管内注入相应体积的生理盐水。次日开始每日灌胃给药，正常对照组、模型组灌胃蒸馏水；阳性药物组将NAC以蒸馏水溶解，配制成浓度为0.2g／ml的溶液，低剂量组按200mg/kg体重灌胃给药、高剂量组按600mg/kg体重灌胃给药。连续7天。 2.2 标本采集 灌胃给药的第7天，各大鼠麻醉后腹主动脉采血。离心后吸取血清分装，-70℃低温冰箱保存备测。 大鼠采血后，仰卧位固定于操作台，分离颈部气管，然后迅速用器械分离气管，用生理盐水2.5ml行肺泡在体灌洗,如此反复5次，最终回收量约8 ml的BALF。过滤、离心，取上清液及细胞沉淀物分装，保存于-70℃冰箱中待测。 2.3 肺泡灌洗液（BALF）、血浆还原型谷胱甘肽（GSH）含量测定 采用Ellman法，以GSH作标准，检测BALF和血浆中GSH含量，用以评定NAC的抗氧化作用。 2.4 BALF、血清超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定 检测BALF和血清中SOD含量，用以评定NAC的抗氧化作用。按照试剂盒说明书步骤，以分光光度计比色法测定各管吸光度值，根据计算公式求出各样本中的SOD活性。