异氟醚和异丙酚后处理对内毒素血症大鼠肺泡毛细血管屏障功能影响实验得研究.pdfVIP

异氟醚和异丙酚后处理对内毒素血症大鼠肺泡毛细血管_听!障功能影响的实验研究 前言 整性对于维持正常肺功能是极其重要的。相邻内皮细胞之问存在紧密联接(tight junction，TJ)和粘附联接(adherensjuncton，AJ)，内皮细胞与基底膜之问有焦点 粘附联接(focal 子物质以及白细胞进出毛细血管，通过前者称为细胞旁途径，通过后者称为穿细 胞途径【1￡”J。病理情况下，大分子物质(如白蛋白)透出毛细血管的主要途径为 细胞旁途径【171，而紧密联接和细胞骨架的调节在此过程中起着重要作用。参与 occludens，ZO)等 【l“。其中JAM为一次性跨膜蛋白；咬合蛋白和闭合蛋白为4次跨膜的连接蛋白， 其N端和C端均位于细胞内；ZO位于邻近TJ的内皮细胞内，它的N端与咬合 蛋白胞内区的c端相连，而ZO的C端又与胞浆中细胞骨架的肌动蛋白相连[13A4]。 这样使信号在胞内的细胞骨架和胞外的连接蛋白之间可以沟通。目前研究较多的 锚定于细胞骨架【21,22]。在炎性介质刺激下，由于骨架蛋白活动和内皮细胞回缩， 引起连接蛋白结构和功能失调，细胞间裂隙形成，通透性增大【l”。 据此，我们设想不同麻醉药物对PACB功能影响的差异，是否正是通过对 ”分子(特别是ZO．1和occludin)表达与功能的调控来影响内毒素血症患者 PACB的通透性，并进而影响患者术后ARDS的发生和预后。近来，关于紧密联 接分子表达、结构和功能改变与通透性调节相关性的研究已成为热点，但尚未见 到有关麻醉药物对紧密联接分子影响方面的研究。因而，本研究模拟临床情况， 建立大鼠内毒素血症模型，观察异氟醚和异丙酚后处理对其PACB功能的影响， 并就功能学和形态学多方面来评价PACB通透性的改变；同时考察肺组织TJ分 子ZO．1和occludin发生的变化，纵向追踪通透性改变的可能机制，为临床理解 通透性改变的机制和选择合适的麻醉药物提供理论依据。 6 异氟醚和异丙酚后处理对内毒素血症人鼠肺泡毛细血管屏障功能影响的实验研究 第一部分 第一部分异氟醚和异丙酚后处理对内毒素血症大鼠肺泡毛细 血管屏障功能的影响 内毒素廊症是急诊手术患者术前并存的常见病理状念，例如重症胰腺炎、急 性梗阻化脓性胆管炎、肠梗阻、急性消化道穿孔等。而在此类患者术后最常见的 并发症就是急性肺损伤(ALI)或急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。后者以顽固性 低氧血症为临床特点，以肺泡毛细血管屏障功能的破坏导致的肺组织通透性增大 为特征性病理表现¨J。 有研究表明吸入麻醉药和静脉麻醉药对正常肺泡毛细血管屏障(pulmonary {4】、酸误吸【“】等损伤肺的PACB有影响，因而很早就有学者提出有必要就不同麻 醉药物对损伤肺的PACB功能的影响作进一步研究【l“。但是综合以往的研究我 们发现，研究各种吸入和静脉麻醉药物对PACB影响所得的结果并不一致；研究 所用动物模型或给药方案多为麻醉药对损伤的预处理或同时给药‘10,23,24]，这与l临 床情况相差甚远。因而我们设想，对业已形成内毒素血症的大鼠，异丙酚或异氟 醚后处理，可能会对肺泡毛细血管屏障功能产生不同的效应，从而影响术后肺损 伤的发生和预后。 材料和方法 一、 材料 克，由中国科学院上海实验动物中心提供，置于相对清洁、恒温环境中， 分笼饲养，予标准饲料，自由取水。 2．主要试剂： B．W．腹腔注射 1)3％戊巴比妥钠溶液：自配，用时按65mg／kg 2)安尔碘皮肤消毒剂：上海利康高科技有限公司产品 3)异氟醚(Isoflurane)：lOOmY瓶Baxter公司美国 coli 5)内毒素(E055：B5)50mg／包装Sigma公司美国 61伊文思蓝(Evans blue)lOg／瓶Sigma公司美国 71甲酰胺(Formamide)500mY瓶中国试剂进出口公司上海分部 9)2％利多