菹草类胡萝卜素对小鼠肝癌H22抑制作用研究.pdfVIP

菹草类胡萝卜素对小鼠肝癌H22抑制作用的研究 任丹丹 ，黄红霞 ，彭光华 ，张声华 (华中农业大学食品科技学院,武汉 430070) E-mail: rdd80@163.com 摘 要：本文研究了菹草类胡萝卜素（CEPC）的抗癌作用及其对免疫功能的影响。以动物移 植性肿瘤小鼠肝癌H22为模型，以环磷酰胺为阳性对照，以色拉油为阴性对照，观察 5，10， 20 mg/kg.d的CEPC的体内抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠肝脏中MDA，SOD的影响，通过CEPC对二 硝基氟苯（DNFB）诱导的迟发型变态反应（DTH），对淋巴细胞增殖反应的作用和NK细胞活 性的测定来观察其对免疫系统的影响。结果表明低中高浓度的CEPC与阴性对照组相比对肝癌 H22瘤细胞均有较强的杀伤力，对荷瘤小鼠肝脏中MDA有降低作用,对SOD有增强作用，且CEPC 对小鼠免疫系统具有较强的激活作用。提示CEPC对移植性H22肿瘤小鼠具有抗肿瘤作用，并对 免疫功能有调节作用。 关键词：菹草； 类胡萝卜素； 抗肿瘤； H22； 免疫调节 1. 引 言 菹草(Potamogeton crispus L.)是眼子菜科多年生沉水维管束植物，它广泛分布于江河、 湖沼、渠沟、池塘和沼泽等处。它的营养十分丰富，现广泛用于畜禽鱼的优质饲料。在湖北 的仙桃、洪湖等蛋鸭饲养地区，发现蛋鸭采食菹草后能产下优质的红心鸭蛋，这种红心蛋蛋 黄因呈现独特绚丽的天然红色而备受消费者青睐。实验证明菹草类胡萝卜素是红心鸭蛋中红 [1] 色素的主要来源 。 本文研究了菹草类胡萝卜素抑止小鼠肝癌肿瘤H22生长效果，并探讨了其对荷瘤小鼠免疫 功能的调节作用。从免疫学角度探讨了菹草类胡萝卜素抑止肿瘤活性的机理，为广泛开发和 利用类胡萝卜素提供理论基础。 2. 材料与方法 2.1 材料和仪器 鲜菹草经石油醚：丙酮（1：1）提取后，用 40 ％KOH 的甲醇溶液皂化过夜，得到菹草 类胡萝卜素粗提物（CEPC ），用色拉油溶解。SPF级昆明雌性小鼠，20-22g ，由湖北省预防 医学科学院实验动物中心提供。批准号为鄂动字 19-082。H22肝癌细胞由湖北省预防医学科 学院实验动物中心提供。环磷酰胺（Cy）为江苏恒瑞医药股份有限公司出品，批号为 １ １ 基金项目： 2002 年度教育部博士点基金资助项目（NO.20020504008 ） - １ - 四氮唑盐（MTT,Sigma），RPMI1640 培养基（Gibco），二硝基氟苯（DNFB，E.Merck）， 超氧化物歧化酶（SOD）测试盒，丙二醛 MDA 检测试剂盒，蛋白检测试剂盒均为南京建成生 物工程研究所产品。酶标仪（Model 550 ， Bio －RAD ），超声波细胞粉碎机（JY96- Ⅱ型， 宁波科生仪器厂） 2.2 方法 2.2.1 接种方法 无菌抽取接种H 瘤种8 天的小鼠的腹水, 以生理盐水稀释10 倍, 0.02 % 22 伊红（台盼蓝）染色, 滴加到细胞计数板上计数后,调细胞浓度至2.5 ×107个 / ml , 于小 鼠后肢腋窝下接种每只0.2ml。 2.2.2 给药方法 按体重随机分组，将小鼠分成肿瘤阴性对照组，环磷酰胺阳性对照组 20mg/kg.d ，菹草类胡萝卜素低（5mg/kg.d ），中（10 mg/kg.d），高（20mg/kg.d ）剂量组， 每组各 10 只。除环磷酰胺组外，其余每组在接种前一个星期开始经口灌胃给药，阴性对照 组给予一定剂量的色拉油。接种后次日各组均给药，连续 9 天，第 10 天处死小鼠后实验。 2.2.3 肿瘤抑制实验 处死小鼠，摘瘤称重，以抑瘤率判断抑瘤效果。 对照组瘤重－实验组瘤重 抑瘤率（% ）＝ 对照组瘤重