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17β-雌二醇联合杜仲醇对SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制分析.pdf

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AnatRes,2025,Vol.47,No.1

解剖学研究2025年第47卷第1期11

·论著

17β-雌二醇联合杜仲醇对SD大鼠骨髓间充质干

细胞成骨分化的影响及机制分析

杨燕兵,苏红青,张玉宝,庄忠宝²,刘衡!

1衡水市第二人民医院骨二科,河北衡水053000;²河北北方学院药学院,河北张家口075132

【摘要】目的探讨17β-雌二醇(17β-E2)联合杜仲醇对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的

影响,并阐明其成骨诱导的作用机制。方法通过全骨髓法分离提取SD大鼠BMSCs,连续传代3次,采用

倒置光学显微镜观察传代培养BMSCs的细胞学形态。将第3代BMSCsSD大鼠细胞分成对照组、17β-E2

组、杜仲醇组及联合诱导组,培养24h后各组相应进行成骨诱导。采用CCK-8检测各组成骨诱导第1、2、3d

的BMSCs增殖活性;采用RT-PCR检测各组成骨诱导第7d的碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原蛋白(COL-1)、

Runt相关转录因子2(Runx-2)、骨钙素(OCN)mRNA表达量;采用Westernblot检测各组成骨诱导第7d小

窝蛋白(Cav1)/Hippo信号通路中Cavl、Hippo/转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)蛋白表达;于成骨诱导第

7d,采用二喹啉甲酸(BCA)检测各组ALP相对活性;采用茜素红染色检测各组成骨诱导第21d的钙结节

数量。结果对照组、17β-E2组、杜仲醇组和联合诱导组成骨诱导第1d的细胞增殖活性分别为0.32±

0.03、0.28±0.02、0.29±0.03和0.35±0.04,各组间差异无统计学意义(P0.05);成骨诱导第2d,17β-E2组、杜

仲醇组及联合诱导组的细胞增殖活性(分别为0.57±0.03、0.55±0.04和0.58±0.05)均高于对照组(0.46±0.05)

(P0.05);成骨诱导第3d,联合诱导组的细胞增殖活性(0.72±0.03)显著高于17β-E2组、杜仲醇组(分别

为0.61±0.05、0.58±0.04)(P0.05)。与对照组相比,17β-E2组、杜仲醇组及联合诱导组的ALPmRNA、COL-1

mRNA、Runx-2mRNA、OCNmRNA、ALP活性、钙结节数量、TAZ蛋白表达均更高,而Cavl蛋白表达均降低(P

0.05)。与联合诱导组相比,17β-E2组、杜仲醇组的ALPmRNA、COL-1mRNA、Runx-2mRNA、OCNmRNA、ALP

活性、钙结节数量、TAZ蛋白表达均更低,而Cav1蛋白表达均升高(P0.05)。结论17β-E2联合杜仲醇可显著

提高SD大鼠BMSCs的ALP活性和钙盐沉积,上调ALP、COL-1、Runx-2、OCN等成骨分化相关指标的表达,从而

更能够诱导SD大鼠BMSCs向骨细胞方向分化,可能与抑制Cav1上调Hippo/TAZ信号通路有关。

【关键词】17β-雌二醇;杜仲醇;骨髓间充质干细胞;成骨分化

基金项目:衡水市科技计划项目(2022014079Z)

D0I:10.20021/j.cnki.1671-0770.2025.01.03

Effectof17β-estradiolcombinedwithdulcitolonosteogenicdifferentiationofbonemarrowmesenchymal

stemcellsinSDratsandanalysisofthemechanism

YANGYan-bing,SUHong-qing,ZHANGYu-bao,ZHUANGZhong-bao,LIUHeng

DepartmentofOrthopedics,HengshuiSecondPeoplesHospital,Hengshui,HebeiProvince053000,China;’College

ofPharmacy

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