GB/T 5413.9-1997婴幼儿配方食品和乳粉　维生素A、D、E的测定.pdf

GB/T5413.9-1997 前 言 测定维生素A,D,E的方法很多，但广为采用的是高压液相色谱法，方法快速、准确，并避免了三种 成分的相互干扰。 本标准由中国轻工总会提出。 本标准由全国乳品标准化中心归口。 本标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心。 本标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公 司、雀巢(中国)投资服务有限公司。 本标准主要起草人:杨金宝、王芸。 中华人民共和国国家标准 婴幼儿配方食 品和乳粉 Gs/T5413.9-1997 维生素A,D,E的测定 Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren -DeterminationofvitaminA,D,Econtent 1 范围 本标准规定了用液相色谱法测定维生素A,D,E的方法。 本标准适用于各种婴幼儿配方食品和乳粉中维生素A,D,E的测定。 2 方法提要 样品中脂溶性维生素在皂化过程中与脂肪分离，经(用)石油醚萃取后，用高压液相色谱，紫外检测 器定量测定。 3 试荆 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯;所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。 3.1高峰氏淀粉酶(Taka-Diastase), 3.2 异丙醉:色谱纯。 3.3焦性没食子酸的乙醇溶液:15g/L, 3.4 氢氧化钾溶液:质量比为100150, 3.5 石油醚:沸程30^-600C, 3.6 甲醇:色谱纯。 3.7 正己烷:色谱纯。 3.8 环己烷:色谱纯。 3.9 维生素A,E标准溶液 3.9.1维生素A标准贮备液，含维生素A100t,g/mL的甲醇溶液。 称取10mg的维生素A，用甲醉定容于100mL容量瓶中。 3.9.2 维生素E标准贮备液，含维生素E400kg/mL的甲醇溶液。 称取40mg的维生素E，用甲醉定容于100mL容量瓶中。 3.9.3维生素A,E标准工作液，其中维生素A的浓度为2pg/mL，维生素E的浓度为20,1g/mLa 取1mL维生素A标准贮备液(3.9.1)和2.5mL维生素E标准贮备液(3.9.2)于50mL容量瓶中， 用甲醉溶解。 3.10 维生素D标准溶液 3.10.，维生素D:标准贮备液，含维生素D,100pg/mL的甲醇溶液。 称取10mg的维生素D,，用甲醇定容于100mL容量瓶中。 3.10.2 维生紊D,标准贮备液，含维生素D,100Kg/mL的甲醇溶液。 国家技术监件局1997一05一28批准 1998一09一0，实施 GB/T5413.9-1997 称取Iomg的维生素D3，用甲醇定容于100mL容量瓶中。 3.10.3维生素D标准工作液，其中维生素Dz、维生素D:的质量浓度均为lag/mL, 取维生素D:标准贮备液1mL,维生素D3标准贮备液ImL于l00mL容量瓶中，用甲醇定容。 4 仪器 常用实验室仪器及: 4.1平底烧瓶:250mLa 4.2分液漏斗:500mL, 4.3 旋转蒸发器。 4.4 高压液相色谱仪:具有可变波长的紫外检测器、数据处理系统或记录仪。 5 操作步骤 5门 样品处理 5.1.，含淀粉的样品 准确称取log样品，放人250mL平底烧瓶中，加人1gTaka淀粉酶(3-1)，再加入30mL45~50C的 蒸馏水，混合均匀后，用氮气排除瓶中空气，盖上瓶塞，置45C烘箱内30min, 5.1.2 不含淀粉的样品 准确称取log样品，置于250mL平底烧瓶中，加30mL蒸馏水。 5.2 测定液的制备 5.2.1于上述处理过的样品溶液中加人100mL的没食子酸乙醇溶液0.3)，充分混匀后加50mL氢氧 化钾溶液((3-4)，在蒸汽浴上连续回流30min后，立刻冷却到室温。 5.2.2 将皂化液转入一500mL分液漏斗中，用100mL水分几次冲洗平底烧瓶，洗涤液并入分液漏斗