分子生物学-07-1-生物信息的传递-1转录的观点-酶学-原核启动子讲解材料.pptVIP

微RNA 基因 前体miRNA Drosha核酸内切酶 Dicer核酸内切酶 不对称的RNA介导的 沉默复合体 核糖体 翻译抑制 mRNA切割 miRNA的 作用机制 miRNA有三种确定的调控结果 3.1.3 RNA的功能 指导合成蛋白 初始转录物加工（核酶的作用） 参与基因表达调控 承担遗传物质的作用（某些病毒中） 3.2 RNA转录的基本过程page74 1.RNA聚合酶进行模板识别并结合在模板上的启动子区 真核生物RNA聚合酶不能直接识别 2.转录起始， 形成2-9碱基的短链，通过启动子区 3.转录延伸 4.转录终止 详细过程后面讲述 3.3 转录机器的主要成分3.3.1 RNA聚合酶 1 原核生物RNA聚合酶 以E.coli为例： 该酶由5个亚基组成：α2ββ’σ。有时还看到另外一个亚基即ω，它的功能还不清楚。α2ββ’这样的整个酶分子称为核心酶，核心酶与σ亚基结合后称为全酶。σ的最主要的功能是识别启动子，β亚基的功能是参与同底物的结合并且催化磷酸二酯键的形成，β’亚基的功能是与有义链结合，α亚基可以参与全酶和启动子的结合。除了RNA聚合酶之外，转录还需要有其它的因子的参与，比如释放因子ρ等。 sigma 1960-1961年几乎同时由S.Weiss, J.Hurwitz和Audrey Sterens在E.coli及各种真核和原核细胞中发现了RNA聚合酶。 全酶 = 核心酶 + σ因子 识别启动子 聚合反应，催化磷酸二脂键形成 与有义链结合 参与全酶和启动子的结合 参与全酶和启动子的结合 原核生物RNA聚合酶各个亚基的功能 sigma P82 希腊字母读音表 大写 小写 英文注音 国际音标注音 中文注音 Α α alpha alfa 阿耳法 Β β beta beta 贝塔 Γ γ gamma gamma 伽马 Δ δ deta delta 德耳塔 Ε ε epsilon epsilon 艾普西隆 Ζ ζ zeta zeta 截塔 Η η eta eta 艾塔 Θ θ theta θita 西塔 Ι ι iota iota 约塔 Κ κ kappa kappa 卡帕 Λ λ lambda lambda 兰姆达 Μ μ mu miu 缪 Ν ν nu niu 纽 Ξ ξ xi ksi 可塞 Ο ο omicron omikron 奥密可戎 Π π pi pai 派 Ρ ρ rho rou 柔 Σ σ sigma sigma 西格马 Τ τ tau tau 套 Υ υ upsilon jupsilon 衣普西隆 Φ φ phi fai 斐 Χ χ chi khai 喜 Ψ ψ psi psai 普西 Ω ω omega omiga 欧米伽  另外在真核生物的细胞器中， 如线粒体、叶绿体中 都有自己的RNA聚合酶系统， 但是它们都是由核基因编码的。 表3-2 大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析page82 亚基 基因 相对分子量 亚基数 组分 功能 α rpoA 36500 2 核心酶 核心酶组装，启动子结合 β rpoB 151000 1 核心酶 β和β共同形成RNA合成的活性中心参与同底物的结合并且催化磷酸二酯键的形成 β rpoC 155000 1 核心酶 β’亚基的功能是与有义链结合 ω rpoZ 11000 1 核心酶 连接？ σ rpoD 70000 1 σ因子 存在多种σ因子，用于识别不同的启动子 2. 真核生物RNA聚合酶 酶 位置 转录产物 相对活性 对α-鹅膏蕈碱的敏感性 RNA聚合酶Ⅰ 核仁 rRNA 50-70% 不敏感 RNA聚合酶Ⅱ 核质 hnRNA mRNA 20-40% 敏感 RNA聚合酶Ⅲ 核质 tRNA 5S rRNA snRNA 约10% 存在物种特异性 真核细胞的三种RNA聚合酶特征比较 P83 ● 真核生物RNA聚合酶 酶 亚基 RNA聚合酶Ⅰ RPA1/2,RPC/5/9,RPB6………另外9个 RNA聚合酶Ⅱ RPB1/2/3/11/6 ………等12个 RNA聚合酶Ⅲ RPC1/2/5/9, RPB6 ，RPD9等12-15个 真核细胞的三种RNA聚合酶的亚基 P84 RPA = RNA polymerase I RPB = RNA polymerase II RPC = RNA polymerase III RPD = RNA polymerase IV * 子曰： 温故而知新 可以为师矣 新解： mRNA发现 1955年Brachet用洋葱根尖和变形虫进行实验： ??若加入RNA酶，则蛋白质合成就停止； ??若再加入酵母的RNA，又可合成蛋白质 ？ ？ 1955年Goldstein和