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分子生物学-07-2-生物信息的传递-2真核启动子-转录过程讲解材料.ppt
填空:在转录起始阶段,通常可以分为四个阶段,分别是 A 核心酶在σ因子的参与下与模板的DNA接触,生成非专一的,不稳定的复合物在模板上移动,可能的机制是氢键互补学说 B 起始识别:全酶与模板的启动子结合,产生封闭的“酶-启动子二元复合物”(closed binary complex) C 酶紧密地结合在启动子的-10序列处,模板DNA局部变性,形成“开放的酶-启动子二元复合体”(open binary complex) D 酶移动到转录起始点上,第一个rNTP转录开始,σ因子释放,形成酶-启动子-rNTP三元复合体 转录循环理论解释延伸过程 Transcription cycle-translocation mechanism 笔直 弯折 转录的生化机制(分子上不讲)biochemical reaction involved in the RNA polymerase-catalyzed synthesis of RNA on a DNA template strand 真核生物的转录起始较为复杂 目前已知RNA聚合酶Ⅱ有多种不同的蛋白因子参与转录复合体的形成。 这些蛋白因子被称为转录因子(transcriptional factor, TF,page76)。包括 TFⅡA,TFⅡB,TFⅡD,TFⅡE,TFⅡF,TFⅡ-I等。 主要的特点是真核RNA聚合酶不能直接与DNA结合,而是 需要各种转录因子的介导 转录因子 转录复合体 TBP TAFs TFIIA TFIIB TFIIF Pol II TFIIE RNA pol Ⅱ的转录起始 ● 真核生物转录起始复合物 TATA 另一个图 转录起始是基因表达调控的关键,多种蛋白因子间相互作用 课后作业: 要求:写在纸上 问题:请总结原核生物mRNA和真核生物mRNA的特征分别是什么? 转录的终止问题 同样是一个棘手的问题,因为细胞中存在有强烈的RNA酶活性,初级转录物刚刚转录出来后,就有可能被RNA酶降解掉了,因此,很难在初级转录物上找到一个特定的碱基以表示它转录到此为止。 在原核生物中初级转录物的3’末端不断的遭到降解,在真核生物中,同样是初级转录物的3’末端经过降解,然后才加上polyA尾巴。 尽管这样,人们还是通过比较多种原核生物RNA中止位点附近的序列,发现了一些提供转录终止的信号,也就是说,转录的终止作用需要有终止子提供终止信号。 这种终止信号称为终止子。 终止的本质 终止子:DNA序列上提供转录终止信号的一段序列称为终止子。但是真正起终止作用的不是DNA序列本身而是由此转录出来的RNA,在这一点上启动子和终止子是不同的。 terminator 4、转录终止page90 终止子(terminator,t) ●强终止子 - 内部终止子 不依赖Rho (ρ)因子的转录终止 ●弱终止子 - 需要ρ因子(rho factor) 又称为ρ依赖性终止子 (Rho-dependent terminator) (1)不依赖?因子的终止 终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区,RNA形成发夹结构; 在终止位点前面有一段由4-8个A组成的序列,RNA的3’端为寡聚U 发夹式结构和寡聚U的共同作用使RNA从三元复合物中解离出来。 RNA聚合酶被这个发夹结构阻止 Sequence of a ?-independent terminator and structure of the terminated RNA 第3章 生物信息的传递(上) ——从DNA到RNA 问题:以下说法关于转录正确的是( ) A 转录具有不对称性 B 转录具有方向性 C 合成的RNA中,如只含一个基因的遗传信息,称为单顺反子;如含有几个基因的遗传信息,则称为多顺反子 D 有特定的起始和终止位点 RNA转录合成时,只能以DNA分子中的某一段作为模板,故存在特定的起始位点和特定的终止位点,特定起始点和特定终止点之间的DNA链构成一个转录单位,通常由转录区和有关的调节顺序构成 A B C D CAP位点 即环腺苷酸受体蛋白位点。但这个位点并不是所有的启动子都有的。 以大肠杆菌乳糖启动子为例,CAP位点有两个,一个位于-70到-50,另一个位于-50到-40。至于这两个CAP位点是起什么作用的,以后我们在基因表达调控中再详细地讲述。 上面主要讲述了原核生物操纵元的主要序列启动子,因为它与转录关系十分密切,所以应该有一个比较详细的介绍,另外的几
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