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(仪器分析课件）10.5 高效液相色谱分析基本方法的建立及定性定量基本方法.ppt
仪器分析教程
第10章 高效液相色谱法
10.5 高效液相色谱分析方法的建立及分析方法
High Performance Liquid Chromatography （HPLC)
10.5.1 HPLC分析方法的建立
10.5.2 HPLC定性定量方法
10.5 HPLC分析方法的建立及分析方法
10.5.1 HPLC分析方法的建立
1.了解样品信息和分析目的
样品的大体组成、浓度范围、组分的物理性质和紫外光谱图及分析目的。
2 .样品预处理
称重、稀释；液液萃取、液固萃取、提取，蒸馏等
10.5 HPLC分析方法的建立及分析方法
10.5.1 HPLC分析方法的建立
3.选择合适的分析方法
原则：一般根据试样的相对分子质量大小，溶解度及分子结构等进行分离方法初步选择。
10.5 HPLC分析方法的建立及分析方法
10.5.1 HPLC分析方法的建立
4.样品的检测
根据被测化合物性质选择适当的检测器。
如：紫外检测器一般检测含有共轭不饱和键的化合物。
5.HPLC的注意事项
①流动相要清洁；②应对样品进行净化预处理；③样品
进样量适当；④控制好pH值范围（一般2-8）；⑤选择适
当的缓冲溶液；⑥控制好系统的压力（一般＜15Mpa);
⑦经常清洗色谱柱。
10.5 HPLC分析方法的建立及分析方法
10.5.2 HPLC定性定量方法
1.HPLC定性方法
①GC的定性方法基本上都可用于HPLC
②利用HPLC检测器的选择性进行定性
③利用反相色谱中的“a，C”指数定性
反相色谱中有机调节剂的浓度c与待测组分的分配比k之间满足对数
线性关系，可表示为：
某一组分的a，C指数与某已知标样相同，即可认定两者为同一种化合物
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