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(5)简述PCR技术的主要应用。 (要求3项以上)。 关键信息 “过氧化氢酶”、“缓冲液”、“透析”、“PCR”、“反向平行”、“DNA片段” 知识依据 蛋白质的提取与分离,PCR技术 遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定 完整分析 Ⅰ.(1)酶的活性受酸碱度、温度等条件的影响。使用缓冲溶液达到细胞因吸水而涨破的目的,又不会因溶液酸碱度不适宜而影响酶的活性。(2)透析去除分子量较小的杂质,即样品的粗分离。(3)电泳技术就是在电场的作用下,利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差 异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。(4)在该实验中温度应是实验变量,所以为了确保实验结果的可靠性,应该排除其他能导致过氧化氢酶分解的因素。 Ⅱ.(1)DNA聚合酶工作时必须要有一个引物,它只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3′羟基上,与DNA母链结合的RNA引物就提供这个羟基。(2)因PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链,所以用于催化DNA复制过程的DNA聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来。(3)DNA复制的两条链均 作为模板,进行半保留复制,所以复制5次后得到的子代DNA分子数为25=32个。(4)新合成的DNA链带有引物,而最初的模板DNA的两条链不带有引物。(5)PCR技术可以对DNA分子进行扩增,所以可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。 图示植物芳香油(玫瑰精油、橘皮精油、胡萝卜素)的提取步骤。 答案 (1)玫瑰精油的提取实验流程(水蒸气蒸馏法) 鲜玫瑰花+清水(1∶4)→水蒸气蒸馏→油水混合物 分离油层 除水 玫瑰油。 (2)橘皮精油的提取实验流程(压榨法) 石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮油。 (3)胡萝卜素的提取实验流程(萃取法) 胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素。 植物有效成分提取 加入NaCl 加入无水Na2SO4 过滤 思考:上述各过程的原理是什么? 答案 (1)水蒸气蒸馏法:原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来。 (2)压榨法原理是通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油。 (3)萃取法原理是使提取物溶解在有机溶剂中,蒸发后得到提取物。 生物组织中有机物的提取方法有很多种。例如,凝胶色谱法、电泳法、蒸馏法、压榨法和萃取法等,不同的有机物提取的方法各有不同。 (1)玫瑰精油称为“液体黄金”,是世界香料工业不可取代的原料,提取出的玫瑰精油要求不含有任何添加剂或化学原料,其提取方法主要是 。 (2)杏仁油富含矿物质和维生素,是一种质地轻柔、高渗透性的保湿剂,主要通过 法提取。 (3)萃取胡萝卜素前,要将胡萝卜彻底粉碎的主要目的是 。 (4)血红蛋白的提取方法可以采用 ,该方法主要是利用血红蛋白的哪一特性将它与其他物质分开的? 。 水蒸气蒸馏法 压榨 使原料颗粒变小,提高萃取效率 相对分子质量的大小 凝胶色谱法 关键信息 “不含有任何添加剂或化学原料”、“杏仁油”、“彻底粉碎”、“血红蛋白” 知识依据 有机物的提取方法(水蒸气蒸馏法、压榨法、萃取法、凝胶色谱法) 完整分析 (1)玫瑰精油不能含有任何化学原料,所以不能用萃取法,而其又具有挥发性较强等特点,适于水蒸气蒸馏法。(2)杏仁油的提取原料为种子,一般用于食用,应采用压榨法。(3)萃取法的萃取效率在原料相同时决定于萃取剂的性质和使用量。(4)血红蛋白分子大小与成熟红细胞中其他成分相差较大。 1.DNA粗提取与鉴定中各种方法目的 鉴定DNA 加入二苯胺,并沸水浴 DNA析出,除去溶于酒精的蛋白质 加入冷却酒精(95%) 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,水解蛋白质 加入嫩肉粉 ①NaCl溶液物质的量浓度为2 mol/L时,DNA溶解,而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀,通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质 ②当NaCl溶液稀释至0.14 mol/L时,DNA析出,过滤可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白质和其他杂质 溶于NaCl溶 液中并稀释 目的 方法 12.(09·金华十校联考)下列四个选项中,肯定没有采用植物组织培养技术的一项是 ( ) A.花药离体培养得到单倍体植株 B.秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株 C.基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株 D.细胞工程培育“番茄—马铃薯”杂
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