胸腺素β4治疗深Ⅱ度烫伤大鼠血管内皮生长因子表达的的影响.docVIP

精品论文 参考文献 胸腺素β4治疗深Ⅱ度烫伤大鼠血管内皮生长因子表达的的影响 承德医学院附属医院067000 摘要目的：观察胸腺素beta;4治疗对深Ⅱ度烫伤大鼠血管内皮生长因子表达及愈合的影响。方法：将92只实验用雄性SD大鼠建立全层皮肤深Ⅱ度烫伤模型，随机分为对照组和Tbeta;4治疗组。分别于烫伤3、7、10、14d计算皮肤愈合率，观察血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果：治疗第3、7、14d时间，Tbeta;4组烫伤愈合率均明显高于对照组，且中浓度Tbeta;4组、高浓度Tbeta;4组明显高于低浓度Tbeta;4组（Plt;0.05）；免疫组化结果显示Tbeta;4组各时间点VEGF表达均高于对照组，且中高浓度Tbeta;4组VEGF表达明显高于低浓度组。结论：转化生长因子-beta;1（TGF-beta;1）能促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面的愈合，胸腺素beta;4增加TGF-beta;1的表达。 关键词　深Ⅱ烫伤；胸腺素beta;4；转化生长因子-beta;1；血管内皮生长因子 【中图分类号】R644 【文献标识码】A 深Ⅱ度烧伤时损伤皮肤真皮网状层，创面局部肿胀，表皮及真皮浅层形成焦痂，多种类型的细胞、结构蛋白、炎性因子及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）等参与创面的修复[1]。胸腺素beta;4（Thymosin beta;4, Tbeta;4）是由43个氨基酸组成的高度保守的多肽，具有多种生物学功能，能调节G-肌动蛋白偶联蛋白，促进血管生成及皮肤创伤的愈合。本文探讨胸腺素beta;4治疗对深Ⅱ度烫伤大鼠血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。 1材料和方法 1.1研究试剂 Tbeta;4由北京诺思兰德生物技术股份有限公司提供；选用Santa Cruz公司生产的鼠抗VEGF抗体，天津灏洋生物科技有限公司提供鼠抗 ELISA试剂盒和SP，严格按试剂盒说明书进行操作。 1.2烫伤建模及创面处理 选取成年健康雄性SD大鼠92只，体质量约230-250g。经7d适应性喂养，烫伤前均向腹腔内注射10%水合氯醛（0.3ml/100g）麻醉，在所有大鼠两侧脊肋角距脊柱0．5cm处脱毛处理，用直径4cm试管及100℃的砝码烫12s，在每只大鼠脊柱两侧各制备1个直径4 mm的全层皮肤缺损模型。 将造模成功的大鼠随机分为对照组和Tbeta;4实验组，对照组给予磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗，Tbeta;4实验组又分为三个亚组，分别给予不同浓度的Tbeta;4处理伤口，低剂量组（L-Tbeta;4）0.5ug/50ul，中剂量组（M-Tbeta;4）5ug/50ul，高剂量组（H-Tbeta;4）15ug/50ul.所有大鼠创面均用无菌纱布包扎，隔天处理伤口一次。 1.3研究指标 1.3.1　创口愈合率 分别于烫伤后3、7、10、14d照相测量创面未愈合面积，根据取材时伤口面积来计算伤口愈合率，计算公式=（原始烫伤面积-取材各时间点残余创面面积/原始烫伤面积）times;100%。 1.3.2　血管内皮生长因子（VEGF） 分别在烫伤3、7、10、14d取每组大鼠各6只，照相后腔内注射10%水合氯醛麻醉大鼠，无菌下在创面边缘切取面积约2cmtimes;1cm的全层皮肤组织，并处死大鼠。一侧创面皮肤组织制备石蜡切片，另一侧创面皮肤组织一70℃保存后测定ELISA。 1.4 统计学分析 采用SPSS17.0软件包录入数据并进行分析，烫伤愈合率、VEGF表达水平等计量资料用（plusmn;s）表示，采用t检验，P＜0.05表示有统计学差异。 2结果 2.1烫伤愈合率比较 采用MoticMed6 软件计算伤口面积，治疗第3、7、10、14d时，Tbeta;4组烫伤愈合率均明显高于对照组，且M-Tbeta;4组、H-Tbeta;4组明显高于L-Tbeta;4组（Plt;0.05），见表1。 2.2 血管内皮生长因子（VEGF）免疫组化结果 治疗后3d，创面肉芽组织上缘中对照组可见灶状阳性细小血管，L-Tbeta;4组阳性血管均匀分布，M-Tbeta;4组见灶状、带状阳性血管，H—Tbeta;4组可见阳性粗大血管；治疗后7d，对照组见细小血管，L-Tbeta;4组见阳性细小血管，M-Tbeta;4组见条索状阳性粗大血管，H—Tbeta;4组见圆形阳性大血管。治疗后14d，表皮下的肉芽组织中对照组见条索状阳性血管，L-Tbeta;4组见少量灶状阳性细小血管，M-TB4组见阳性细小血管，H—Tbeta;4组见较多灶状分布的条索状细小血管。