胸腺素β4对大鼠深Ⅱ烫伤创面愈合中TGF-β1的影响.docVIP

精品论文 参考文献 胸腺素β4对大鼠深Ⅱ烫伤创面愈合中TGF-β1的影响 承德医学院附属医院067000 摘要目的：观察转化生长因子-beta;1(TGF-beta;1)在大鼠深Ⅱ度烫伤创面组织中的表达，探讨胸腺素beta;4对烫伤创面TGF-beta;1表达及愈合的影响。方法：将60只健康雄性SD大鼠随机分为A、B、C三组，建立大鼠深Ⅱ度烫伤模型后，分别在创面下注射生理盐水、TGF-beta;1 和TGF-beta;1 +Tbeta;4进行干预。结果：烫伤第7、14、21d，B、C两组创面愈合率均明显高于对照组（Plt;0.05，且C组各时间稍高于B组；B、C两组创面皮肤中TGF-beta;1表达均明显高于对照组（Plt;0.05。结论：转化生长因子-beta;1（TGF-beta;1）能促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面的愈合，胸腺素beta;4能增加TGF-beta;1的表达。 关键词　深Ⅱ度烫伤；转化生长因子-beta;1；胸腺素beta;4 【中图分类号】R644 【文献标识码】A 深Ⅱ度烫伤创面的修复一直是医学界面临的难题之一。转化生长因子-beta;1（transforming growth factor-beta;1，TGF-beta;1）是参与创面愈合的重要因子，TGF-beta;1的功能与数量异常直接影响创面的愈合[1]。胸腺素beta;4（Thymosin beta;4, Tbeta;4）是G-肌动蛋白偶联蛋白，能阻断F-肌动蛋白活性，促进皮肤创伤的愈合。本研究探讨TGF-beta;1在大鼠深Ⅱ烫伤创面组织中的表达，以及应用胸腺素beta;4治疗对TGF-beta;1表达及创面愈合的影响，旨在探寻治疗严重烧伤的新方法。 1材料和方法 1.1材料 选取成年健康雄性SD大鼠60只，体质量约240-260g 。随机分为A组(对照组）、B组（TGF-beta;1干预组)和C组（TGF-beta;1联合Tbeta;4干预组），每组各20只。本次研究报请医院动物伦理委员批准。 1.2烫伤建模及创面处理 60只试验大鼠经7d适应性喂养，烫伤前均向腹腔内注射10%水合氯醛（400mg／Kg）麻醉，在背部同一部位脱毛后，用直径3cm试管及100℃的砝码烫13s，制作相同规格的深Ⅱ度烫伤创面模型，随后向腹腔注射0.9%生理盐水5ml复苏处理。 A组大鼠烫伤创面下注射0.5ml生理盐水，B组创面下注射TGF-beta;1 0.5ml(5ng/ml),　C组创面下注射TGF-beta;1 0.5ml和Tbeta;4 0.02g/ml。所有大鼠创面均用无菌纱布包扎和塑料隔水处理，隔天注射一次。重组Tbeta;4由北京诺思兰德生物技术有限公司提供。 1.3研究指标 1.3.1　烫伤创面愈合率 以烫伤后24h创面面积为原始烫伤面积，分别于烫伤后3、7、14、21d测量创面未愈合面积，校对标尺后每个创口重复测量三次，取其平均值来计算创面愈合率。创面愈合率=（烫伤面积-各时间点残余创面面积/原始烫伤面积）times;100%。 1.3.2　TGF-beta;1表达 分别在烫伤第3、7、14、21d，每组各取5只大鼠，腔内注射10%水合氯醛麻醉大鼠，无菌下切取自距创源约1.5mm处至创面的全层皮肤组织，面积约2cmtimes;1cm，随后处死大鼠。将切取的皮肤组织用0.9%生理盐水冲洗3次后置于10%甲醛溶液固定12-24h后石蜡包埋，制作石蜡切片。取不同时间点的创面边缘皮肤石蜡块，采用TGF-beta;1抗体进行一抗免疫组织化学染色，SD法检测、DAB显色后检查TGF-beta;1的表达[2]。人重组TGF-beta;1购自美国Peprotech 公司。一抗TGF-beta;1由北京博奥森生物技术有限公司提供。选用北京中杉生物技术有限公司提供的PBS缓冲液、SP免疫组化染色试剂盒。操作均按试剂盒说明步骤进行。 1.4 统计学分析 采用SPSS20.0软件包录入数据并进行统计学分析，烫伤愈合情况、TGF-beta;1表达等计量资料用（plusmn;s）表示，采用t检验，P＜0.05为有统计学意义。 2结果 2.1烫伤愈合情况比较 三组烫伤第3d愈合率比较无差异性（Pgt;0.05）；烫伤第7、14、21d，B、C两组创面愈合率均明显高于对照组（Plt;0.05），B组与C组各时间比较，差异无统计学意义(Pgt;0.05)。见表1。 3讨论 目前我国广泛采用三度四分法进行烧伤分度，根据烫伤深度、创面的病理改变及临床表现划分为Ⅰ度、浅Ⅱ度、深Ⅱ度、Ⅲ度烧伤。深Ⅱ度烧伤时损伤真皮网状层，表皮