乙肝表面抗原定量检测与HBV-DNA结果的相关性分析.docVIP

精品论文 参考文献 乙肝表面抗原定量检测与HBV-DNA结果的相关性分析 刘瑞菡1,2 陈俊清1 董亮3(通讯作者) (1孝感市中心医院检验科 湖北孝感 432000) (2武汉大学医学院 湖北武汉 430000；3孝感市中心医院输血科 湖北孝感 432000) 【摘要】 目的 探讨化学发光化法乙肝表面抗原定量测定与HBV-DNA 水平及乙肝病毒标志物模式之间相互关系。方法　运用化学发光法、荧光定量PCR (FQ-PCR) 及ELISA三种方法同时检测173清标本, 并对其结果应用统计学方法加以对比分析。结果 173例患者血清HBsAg 含量与HBV-DNA及乙肝病毒标志物检测结果经统计学分析处理，显示其具有良好的相关性。结论　化学发光法定量检测HBsAg 能较准确、快速地反映体内乙肝病毒复制情况。 【关键词】 乙肝表面抗原 乙肝病毒DNA 荧光定量PCR 酶联免疫吸附 乙型肝炎病毒是危害最严重的病毒性肝炎之一,我国是乙型肝炎病毒(HBV)感染的高发区,人群HBV感染率达60%左右,其中HBV携带率约占10%[1]。肝病毒感染的诊断主要依赖于测定血清中乙肝病毒抗原-抗体标志物(乙肝两对HBV-M)和乙肝病毒核酸(HBV-DNA)含量(荧光定量PCR检测)，将其作为临床分析和判断乙肝患者病情、疗效及预后的主要依据,但由于两对半组合模式复杂多样，导致部分患者的HBV感染复制状况难以断;HBV-DNA虽是乙肝病毒感染和复制的特异性指标，表明其具有传染性的最有力的证据[2-3]，但受到实验室要求的严格限制，无法快速检测。本文运用化学发光法对173份清标本HBsAg作出定量检测，并结合HBV-DNA及两对半结果，希望能对乙肝患者的临床诊断、治疗及预后提供及时、准确的依据。 1 材料与方法 1.1 标本来源:2012年3月至2012年5月间我院住院患者173例(主要是感染科、消化内科的病人)，留取静脉血分离血清，-20 ℃保存备检。 1.2 仪器及试剂: HBsAg定量检测所用仪器系美国雅培公司的i2000SR免疫发光检测系统，诊断试剂均由雅培公司提供; HBV-DNA 测定仪系美国Perkin Elmer公司的PE7000自动荧光PCR仪，FQ2PCR 试剂盒由中山大学达安基因股份有限公司提供，试剂盒的灵敏度为200copies/ml;HBV-MELISA诊断试剂盒由上海科华生物技术有限公司提供 1.3 检测方法: 将-20℃冷冻保存的标本取出解冻复融。173份按乙肝两对半不同模式分为8组，见表1。用生理盐水以不同的稀释倍数稀释各组血清样本:乙肝大三阳组按1∶500稀释，乙肝小三阳组和HBsAg(+)、HBcAb(+)组按1∶20稀释，其余组均以原倍检测。将稀释好的血清标本严格按照说明书进行操作，测定HBsAg 含量，单位为IU/ml 。 1.4 数据处理: 将测得的各组HBV-DNA 拷贝数及HBsAg含量(IU/ml) 进行对数转换，并以-xplusmn;s表示,以HBV-DNA对数值为横坐标,HBsAg数值为纵坐标,求线性回归及相关系数(r)。 2 结果 (表-1) 2.1 HBsAg定量与乙肝两对半及HBV-DNA检测结果比较见表-1。 2.2 乙肝表面抗原含量与HBV-DNA相关性分析: 以HBV-DNA为横坐标，HBsAg为纵坐标,发现二者存在明显的正相关，其相关系数(r)=0.93，当HBsAggt;300IU/ml(102.5asymp;300)，HBV-DNA即可出现阳性。 3 讨论 化学发光标记免疫测定是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法，其检测结果具有灵敏度高、重复性好、特异性强、准确性佳、检测快速、无放射性危害等优点[4-5]。雅培i2000SR系统是基于化学微粒子免疫分析(CMIA)检测技术的全自动免疫分析系统，以吖啶酯作为标记发光剂，能够对乙肝两对半作出定量、准确、快速的分析。 本文应用该系统对我院住院患者173例血清标本，作乙肝表面抗原定量分析，发现其与乙肝两对半HBV-DNA具有良好的相关性。乙肝大三阳组45例中，44例HBV-DNA阳性,表明HBV均有活动性复制[6-8]，我们测得的DNA阳性组HBsAg含量为7.2plusmn;2.02IU/ml,其中1例HBV-DNA阴性患者，测得的HBsAg 仅为2.85IU；36例小三阳组中，19例HBV-DNA阳性，说明小三阳患者只有半数左右人群体内含有HBV-DNA，而我们测得的19例HBV-DNA