T—SPOT.TB外周全血检测结核感染145例分析.docVIP

精品论文 参考文献 T—SPOT.TB外周全血检测结核感染145例分析 邱素娟 叶峰山 （厦门大学附属第一医院检验科 361000） 【摘要】 目的 分析T—SPOT.TB检测结核感染的敏感度和特异性，其作为快速、准确的检测手段，给临床提供诊断依据，控制结核感染漫延新法。方法 选择我院呼吸内科和消化内科，不能排除结核病289例，外周血检测T—SPOT.TB 145例，清晨痰培养加涂片144例，对照阳性率。T—SPOT.TB检测阳性率94.4% （137/145），痰培养加涂片41.6%（60/144），经统计学处理P＜0.01，T—SPOT.TB检测优于痰培养加涂片。结果 T—SPOT.TB优于痰中找结核杆菌，T—SPOT.TB检测诊断，可在保持高灵性，高特异性的同时，进一步提高结核分枝检出率。结论 对早期诊断可获得较好治疗效果的肺结核和肺外结核患者，该选择灵敏度高，特异性强，T—SPOT.TB快速检测有一定优势。 【关键词】 结核杆菌 血液检测（T—SPOT.TB） 痰检测方法 我院从2012年1月至2012年12月，一年时间，标本来源本院呼吸内科和消化内科，按日期，随机抽样单数和偶数分为二组，单数为甲组（T—SPOT.TB）检测组145例，偶数144例为乙组（痰涂片加培养），操作流程（按全国结核病细菌等操作规程），现将甲乙两组检测情况报道如下： 一、资料与方法 1 性别和年龄构成：男性156例占54%，女性133例占46.0%，年龄14—20岁 16例占0.6%，21岁—30岁75例占29.4%，31—40岁 60例占21.3%，41岁—50岁59例占20.4%，51岁—60岁30例10.3%，61岁—70岁34例占12.0%，71—80岁占0.5%。 2 原理：T—SPOT.TB是利用结核特异抗原（ESAT—6CFP—10），通过酶联免疫斑点技术（ELISPOT）检测受试者，体内是否存在结核效应T淋巴细胞，从而判断目前该受试者是否感染结核杆菌（现症感染）的新方法。 3 方法：采血送检（时间要求）与方法。 采集外周全血，无须空腹，需用肝素/肝素锂/肝素钠抗凝，不使用EDTA抗凝，2岁以下儿童2—3ml血，其它患者，4—6ml，免疫力低下，患者6—8ml，样本温度控制15—25℃，保持与运输不得冷冻/冷藏，样本采集4小时内送到实验室，8小时内完成检测，1周内有输血史或做PET—CT的患者会影响血液中淋巴细胞的分离，建议两周后再行检测，运输过程中防止颠簸，避免样本溶血影响结果。 二、操作流程 1 外周抗凝全血梯度离心分离PBMCSC（外周血单个核细胞）。 2 结核特异抗原CESAT—6/CFP刺激结核特异的效应T淋巴细胞，使其分泌г干拢素。 3 效应T淋巴细胞分泌的г干拢素与膜板预包被的抗—干拢素抗体结合并固定在细胞周围。 4 位统的ELISA“双抗夹心法”，使抗原抗体结合物显色，形成斑点，进行对照阴性和阳性结果。 三、判断标准 1 阳性结果参照以下标准：空白对照孔斑点数为0—5个时且＜抗原A或抗原B孔的斑点数）ge;量6。 2 空白对照孔斑点数为6—10个时且＜抗原A或抗原B孔的斑点数ge;2times;（空白对照孔斑点数）如果上述标准不符合且阳性质控对照孔正常时检测结果为阴性。 3 影响检测结果因素 阴性结果：提示患者体内不存在针对结核杆菌特异性的效应T细胞，如出现以下情况，阴性不能排除感染的可能：①因感染阶段不同（如标本是细胞免疫发生前获取的）引起的做阴性结果。②少数免疫系统功能不全，疾病的情况，如HIV感染者，肿瘤患者、儿童等。③以及其它免疫等，实验非正常操作差异。 阳性结果：提示患者体内存在针对结核杆菌特异的效应T细胞，患者存在结核感染。但是否为活动性结核病，需结合临床症状及其它检测指标综合判断。T—SPOT.TB结果不能作为单独的或者决定的诊断结核病依据。 虽然ESAT—6和CFP—10在所有的卡介苗（BCG）菌株，以及绝大数环境分枝杆菌中缺失，但T—SPOT.TB的阳性结果有可能是堪萨斯、苏氏、戈登或海分枝杆菌的感染引起的。 四、结果 按全国细菌检测等操作规程，进行甲组T—SPOT.TB外周血145例检测，乙组痰培养和涂片检查144例，通过统计学处理，T—SPOT.TB检测137/145，阳性率94.4%；痰培养加涂片60/144，阳性率41.6%，见表1。 表1