HBV-DNA荧光定量与ELISA测定乙肝五项指标及肝功能相关性分析.docVIP

精品论文 参考文献 HBV-DNA荧光定量与ELISA测定乙肝五项指标及肝功能相关性分析 容文潮 苏明茂 黄秀华 赵一帆（台山市人民医院检验科 广东江门 529200） 【摘要】 目的 探讨HBV-DNA定量与不同血清学标志物(HBV-M)及肝功能的关系；方法 对352例HBsAg阳性患者血清用RQ-PCR定量法测定HBV-DNA含量，用ELiSA法测定HBV-M，同时进行肝功(ALT、AST、r-GT)测定。结果 HBV-DNA定量大三阳组显著高于小三阳组和（HBsAg+HBcAb）组（Plt;0.05）；HBV-DNA定量与ALT、AST、r-GT含量呈一定的正相关性（Plt;0.05）。结论 HBV-DNA定量与HBV-M关系密切，与ALT、AST和r-GT有一定的相关性，全面检测各项指标有利于乙肝患者的诊断和治疗。 【关键词】 HBV-DNA HBV-M 肝功三酶 检测 乙肝病毒是引起乙型肝炎的病原体，是我国常见的传染病，其传染性和病死率均居高不下，我国每年约有1.2亿人感染乙型肝炎病毒（HBV），每年约有30万人死于慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌等相关性疾病，严重危害人们的健康[1]，目前，乙型肝炎病毒感染诊断检测手段较多，主要是血清学标志物（HBV-M）的检测和HBV-DNA含量的检测。荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）具有较高的特异性和灵敏度，克服了常规PCR假阳性的特点，实现对HBV-DNA的定量检测可直接监测血清中HBV-DNA的复制情况，能为乙肝患者提供准确的病原诊断和抗病毒治疗的正确评估。酶免疫吸附试验(ELISA)法检测乙肝血清学标志物（HBV-M）是目前诊断乙型肝炎的免疫状态[2]，是一种定性分析。我院采用了FQ-PCR法对2011年352例乙肝患者血清进行了HBV-DNA定量检查，同时予以HBV-M以及肝功三酶（ALT、AST、r-GT）的检测，并对结果进行了比较和相关分析。现报告如下： 1 资料和方法 1.1对象 为台山市人民医院2011年1～12月住院及门诊的乙肝患者352例。其中住院32例，门诊320例。所有诊断符合第十次全国病毒性肝炎防治方案。 1.2方法 1.2.1 HBV-DNA定量检测采用实时荧光定量PCR技术。使用DA7600基因扩增检测仪及试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供。试剂盒的灵敏度为5.0times;102cpoy/ml；操作人员为持有广东省临检中心PCR实验室上岗证的专业人员，实验室是通过省临检中心PCR实验室认证的基因诊断实验室。 1.2.2 HBV-M检测 酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清学标志物，仪器为国产MULTISKAN ML3酶标仪，试剂购于厦门英科新创科技有限公司。严格按试剂合说明书操作。 1.2.3 肝功能（ALT、AST和r-GT）检测 采用奥林巴斯Au2700全自动生化分析仪检测，试剂为上海荣盛科技有限公司提供。 1.3统计方法 采用SPSS11.0统计软件，组间比较 采用t检验。 2 结果 2.1 HBV血清学标志物与HBV-DNA含量的对比分析。 大三阳组HBV-DNA含量显著高于小三阳组及（HBsAg+ HBcAb）组（Plt;0.05）；见表1 。 表1 HBV血清学标志物与HBV-DNA含量的对比分析 2.2 HBV-DNA含量与肝功三酶的数值分析 HBV-DNA含量高的病人，其肝功能(ALT、AST、r-GT）的指数上升的比例占多数，有一定的相关性（Plt;0.05），见表2、3、4。 表2 HBV-DNA 含量与ALT数值分析 3 讨论 ELISA法是检测乙肝病毒血清学标志物(HBV-M)最常用的传统检查手段，该法简便、快速、经济，可以判断乙肝病人不同的感染期[3]，但是一种定性分析，由于HBV感染后所表达和机体免疫反应受多种因素影响[4]，如果仅以此法来判断HBV感染者的传染性，治疗效果以及HBV是否在体内复制具有一定的局限性。随着分子生物技术的发展，应用FQ-PCR技术定量检测HBV-DNA,其结果准确、灵敏度和特异性较高，能直接，准确反映患者体内乙肝病毒的复制水平[5]，在临床上起到重要的作用。 3.1 从表1结果看，大三阳组HBV-DNA阳性率最高（97.52%）[6]，DNA含量偏高 (gt;107copy/ml)也占多数（61.99%），与传统观念认为HB