强骨宝方含药血清对糖尿病模型鼠体外培养成骨细胞的影响.pdfVIP

· 190· 中国骨伤2008年3月第21卷第3期 China J OrthopTrauma，Mar．2008．Vo1．21．No．3 · 基础 研 究 · 强骨宝方含药血清对糖尿病模型鼠体外培养 成骨细胞的影响 苏友新 ，郑良朴2陈智能 ，杨连梓 ，王和鸣 (1．福建中医学院骨伤系，福建 福州 350108；2．福建中西医结合研究院；3．福建省第二人民医院) ’【摘要】 目的：探讨糖尿病模型鼠强骨宝方含药血清促进体外培养成骨细胞分化、矿化的最佳时相与量效。方 法：采用胰蛋白酶一Ⅱ型胶原酶消化法从 1～2日龄SD大鼠颅盖骨中分离出成骨细胞，鉴定细胞后，用不灭活的不同时 效(灌胃3、5 d，末次灌胃后 1、3 h)、不同浓度(5％、10％、20％)的强骨宝方糖尿病模型鼠含药血清加入成骨细胞培养 体系，培养7、18 d，分别观察各组ALP活性及矿化结节形成量。结果：各浓度的糖尿病模型鼠强骨宝方含药血清对成 骨细胞分泌ALP及矿化结节形成的作用均优于模型对照组，并接近于正常对照组水平，其中以20％添加浓度的作用 最明显。在时相方面，两指标均以灌药3 d或5 d、末次灌胃后1 h取得血清作用最明显。结论：糖尿病模型大鼠强骨宝 方含药血清对体外培养成骨细胞(OB)的分化及矿化功能有促进作用。考虑到实验的时间与成本，以灌胃3 d、末次灌 胃后1 h、20％不灭活的强骨宝方糖尿病模型鼠含药血清对成骨细胞分化与矿化作用最适宜。 【关键词】 成骨细胞； 细胞分化；模型，动物； 中药疗法 Experimental study on the effects of pharmaco—serum of diabetic rats fed with Chinese herbs Qianggubao decoction (强骨宝方)on osteoblast culture in vitro SU You-xin ，ZHENG Liang-pu，CHEN Zhi-neng，YANG Lian-zi，WANG He— ming． Department ofTraumatology and Orthopaedics，Fujia．College ofTCM，Fuzhou 350108，ruj／a．，China ABSTRACT Objective：To investigate the optimum phase and dose of pharmaco—serum of diabetic rats fed with Qianggubao decoction(强骨宝方)on the differentiation and mineralization of osteoblast(OB)．Methods：OB was isolated from the skull of newly born SD rats aged 1 to 2 days by means of Trypsin-collagenase digestion．After the OB was identified，different kinds of pharmaco—serum of diabetic rats fed with inactive Qianggubao decoction(强骨宝方)of different phase(rats were fed with medicinethree days orfive days afterlastfedwithmedicine one hour orthree houm)and concentration(5％，10％，20％)were added to the OB and incubated．After 7 days and 1 8 days of culture，the effects of the differentiation and mineralization of osteoblast were detected．Results：The secretion of ALP and formation of mineralized nodules of osteoblast in the different doses of pharmaco—serum groups were almost the same as that