稳定同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中24种禁用兽药含量.pdfVIP

第42卷 分析化学(FENxIHIIAⅪ『E)研究报告 第2期 of 233～238 2014年2月 Ch妣seJ0urnal Anal舛calCheIllis廿y DoI：10．3724／SP．J．1眇6．2014．铷哆57 稳定同位素稀释超高效液相色谱·串联质谱法测定 饲料中24种禁用兽药含量 周鹏“’2 林钦2 黄红霞2 杨旺火2 戴明2 刘飞2 王瑛“ 1(南京理工大学化工学院，南京210094)2(国家加工食品质量监督检验中心(福州)，福州350002) 摘要建立了同时定性与定量分析动物饲料种24中禁用药物的超高效液相色谱串联质谱(uHPLC—Ms／ MS)分析方法。样品经Na2HP0。与饱和Nacl溶液共同盐析，乙腈提取，混合阳离子交换固相萃取柱(Pcx) 净化，乙腈和0．3％甲酸溶液梯度洗脱，经BEHc。。色谱柱分离，串联四级杆质谱动态多反应监测正离子模式 监测，稳定同位素标记内标法定量。在最佳实验条件下，24种禁用兽药在各自的线性范围内线性关系良好， 标准偏差小于10％。本方法的样品前处理过程简单，净化效果好，有效解决了基质效应问题，灵敏度高，适用 于各种饲料中多组分禁用兽药的快速定性与定量分析。 关键词超高效液相色谱一串联质谱；稳定同位素内标；动态多反应监测；禁用兽药；饲料 1 引 言 兽药在养殖业发展中具有举足轻重的作用，但是由于养殖环境以及养殖水平不佳，或者为了提高饲 1519号公告∞J，向社会公布了禁用药物清单，包括肾上腺素受体激动剂够，-受体阻断药、抗组胺药、抗高 血压药等药物。这些药物多会通过食物链传导，给人类带来巨大危害。 近年来，科研人员针对不同种类药物，研发出多种分析方法，主要包括基因芯片法MJ、毛细管电泳 0’11|、酶联免疫法¨2]等。 法‘5|、气相色谱．质谱联用法‘6’7]、液相色谱．质谱联用法‘8’9|、高效液相色谱法[1 然而现有方法存在分析目标物种类单一、部分化合物还未发现检测方法，对预混料等复杂基质样品回收 率较差等问题，不利于复杂样本的大规模筛查。本研究对样品处理方法进行改进，结合液相色谱一串联 质谱法建立了24种禁用药物的分析方法，为饲料中违禁药物的监管提供了一种快速、可靠的检测方法。 2实验部分 2．1仪器、试剂与材料 BEH 6490三重四级杆质谱仪，配1290超高效液相色谱仪(美国A西knt公司)；watersC。。色谱柱 mm×2．1 DTH J—E离心机(美国贝克曼公司)；Ds一8510 (100 mm，1．7斗m，美国watells公司)；Avanti 超声波清洗机(上海弗鲁克流体机械制造有限公司)。 标准物质以及稳定同位素内标分别购于德国Dr．Ehren8to如rGmbH和德国witega公司。甲醇、乙 Pcx混合阳离 腈、甲酸(色谱纯，美国Merck公司)；Na2HPO。、Nacl、氨水(分析纯，国药集团)。cleanert 子交换固相萃取柱(PCx，60mg／3 mL，博纳艾杰尔科技公司)；0．22斗m聚四氟乙烯滤膜(津腾公司)； 实验样品为市售样品。 2．2实验方法 2．2．1标准溶液配制分别准确称取各种标准品于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，得到标准储 备液，于一18℃下避光保存。准确移取适量各标准储备液，用10％乙腈一水(含o．2％甲酸)溶液逐级稀