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h5n1亚型禽感病毒rt-pcr及多重rt-pcr检测技术的研究
中文摘要 avian 高致病性禽流感(Highlypathogenic 病毒中的部分H5和H7亚型毒株引起,主要侵袭家禽,引起高发病率、高死亡 率的烈性传染病,世界动物卫生组织(OIE)动物卫生法规将其列为A类动物疫 国、印度尼西亚、老挝相继报道家禽暴发H5N1亚型高致病性禽流感。高致病性 禽流感的暴发不仅给养禽业造成直接经济损失,而且影响贸易的发展。 本文基于H5N1亚型流感病毒基质蛋白、血凝素、神经氨酸酶基因,研究建 用于同时检测和鉴别H5、N1亚型或A型及H5、N1亚型流感病毒。从核酸提 分析16株禽流感和新城疫的病毒分离物或临诊样品,其结果与传统病毒分离鉴 定完全一致,具有高敏感性和高特异性,且与相关病毒(如新城疫病毒)或其它 年采自昆明地区不同家禽的棉试子样品,并与病毒分离鉴定方法比较,研究发现 二者H5N1亚型鉴定结果完全吻合。表明该方法具有具有快速、简便、经济、安 全、敏感、特异等优点,可作为临诊样品中禽流感病毒型及I-15N1亚型鉴定和诊 断以及病毒分布流行病学调查的有效方法。 , 关键词:禽流感病毒;H5血凝素;N1神经氨酸酶;亚型特异性诊断;反转录 聚合酶链反应 Summary avian causes and pathogenic poultryhighmorbidity Highly influenza(HPAI)in A the itiSaListdiseaseof OfficeInternationaldes mortality,and isconfinedtocertainisolatesofinfluenzaAvirus H5andH7 causative agent subtypes December of avian 2004,outbreakshighly During 2003一February pathogenic influenza were inSouth A(H5N1)amongpoultryreported ofHPAIincommercial outbreak Cambodia,Thailand,China,Indonesia,Laos.An not causesdirectdiseaselossesbutoftenresultsintraderestrictionsfor only poultry theaffected country. Inthis and reverse I-IS,N1 paper,typeA·specific subtype—specific chain onthe or polymerasereaction(RT-PCR)assays,based H5N1 influenza neuraminidaseof avian virus,
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