h5n1亚型禽感病毒ns1149位氨基酸对生物学功能的影响.pdf

摘 要 以有限稀释法纯化早期病毒分离储存液，得到两株对鸡致病性完全不同的 亚型低致病力禽流感病毒。全基因组测序表明：二者HA裂解位点氨基酸相同，而 各基因编码的氨基酸中却存在五个氨基酸差异。本论文即为研究HSNI亚型禽流感 病毒GsGD／lD6和GsGD／2／96对鸡完全不同致病性的决定因素。 利用反向遗传基因操作技术，将其两株病毒的基因组分别克隆到PBD载体上构 建成转染质粒，两株病毒存在有不同氨基酸的转染质粒分别替换重组，转染293T M、 RGD／2／1NS。10株重组病毒和两个亲本野毒对SPF鸡的致病性实验表明， GSGD／I／96、GSGD忆／96 H5N1亚型的禽流感病毒的NS基因在对鸡的致病性方面起 重要的作用。 鼻腔感染6周龄的SPF鸡和4周龄的非免疫鹅。实验结果显示H5N1亚型的禽流感 说明了NS基因编码的NSI非结构蛋白对流感病毒在鸡鹅体内的增殖起重要的作 149 用，并且这两株病毒NSl非结构蛋白只有149位氨基酸不同，也可以说NSl 作用。 NSl 位氨基酸的不同。为进一步阐明GSGD，l／96、GSGD／2／96149位氨基酸对Nsl 蛋白拮抗干扰素的影响。将利用反向基因操作技术救获的四株病毒RGSGD／1／96、 基酸影响NSl蛋白拮抗干扰素功能，在病毒感染过程中，NSl蛋白149位为Val 时拮抗干扰素系统的能力弱，病毒感染鸡胚成纤维细胞诱导产生的干扰素足以抑制 不能诱导产生足量的干扰素来抑制VSv-GFP的增殖。 关键词：HSNI亚型禽流感病毒：NSl蛋白；149位氨基酸；干扰素：抗病毒 Avian AminoAcidatPosition149ofNSlProteinforH5N1 InfluenzaVirusInfluenceFunction Biology Abstract GSGD／1／96isthefirstH5N1 avianinfluenzavirusisolatedin highlypathogenic fromtheearliest China．珊len thelimiteddilution stock，we performing purification thatexhibitdifferent for is twoclones chickens，one got pathogenicity highlypathogenic， anotheroneis namedthe virusas pathogenic lowlypathogenic．Therefore，welowly virusesbear basic twoviruseswere both GSGD／2／96．The