小麦内生菌的研究现状.pdfVIP

小麦内生茵研究现状 苗文莉 禹乐乐唐保宏‘ (郑州大学生物工程系河南郑州450001) 摘要：栽培作物内生菌资源丰富，小麦作为重要粮食作物，其内生菌的研究具有重要意义， 日益受剑重视。本文从研究方法、内生菌多样性、内生菌与小麦的关系以及其应用情况等方面对目 前小麦内生菌的研究状况进行概述，以资相关研究参考。 关键词：小麦内生菌多样性生物防治 内生菌(endophyte)一般指在生活史的某一段时期生活在植物组织内，对植物组织没有引起明 显病害症状的有机体，包括一些在生活史中的某些阶段营表面生的内生菌和潜伏性病原菌(Petrini 1991)。内生菌可以促进植株生长或增强宿主植物的抗逆性和抵抗病虫害的能力(Clay1989：Ghimire eta1．1992：Mirlohieta1．2004)。 ＆Hyde2004)；还可用作基因工程的遗传载体(Murray 植物内生菌分布广泛，种类繁多，作为一类新型微生物资源，其重要性日益受到重视。研究表 et 明栽培植物内生菌具有丰富的多样性(Narisawaa』．2002)。小麦是重要粮食作之一，我国是世 界最人的小麦生产和消费国，其内生菌研究受到广泛的重物视。本文对小麦内生菌研究现状进行综 述。 1． 小麦内生茵的研究方法 1．1． 常规培养法 对根、茎、叶和种子等器官进行表面消毒之后进行内生菌分离，表面消毒方法有多种，具体措 et 施和效果因材料而异(Larrana1．2002)。常使用的消毒剂有酒精、次氯酸钠、升汞等。内生真 et 菌的分离多采用切段法进行培养(Larran 2003)或对材料进行研磨后稀释、涂布(Germida＆Siciliano2001)的方法。 培养基种类对内生菌的分离具有重要影响，对8种常用的细菌分离培养基的研究表明胰酶大豆 琼脂和金氏培养基B对内生细菌的分离效果较好，马铃薯葡萄糖琼脂和脑心浸液琼脂的分离效果较 差(王刚等2007)。 1．2． 非培养方法 由于很多微生物不能或不易在实验室中培养，因此不能用传统的鉴定方法对其进行研究，不能 全面了解内生菌的多样性。目前常采用培养方法和非培养方法相结合的策略。分子生物学的方法近 几年广泛应用于内生菌的研究，这对传统方法是很好的补充。但是，对小麦等栽培作物内生真菌的 研究较少。 目前，用于小麦内生菌研究的分子生物学技术包括核酸分子杂交、PCR产物多态性分析和序列 测定、转基因标记等。应用16SrRNA基因的末端限制性内切酶片断长度多态性(T—RFLP)分析对 小麦根部内生放线菌进行研究，揭示了比常规培养方法更加丰富的多样性，土壤类型对小麦内生放 线菌具有显著影响(Corm＆Franco Streptomycessp．进行馏勿基因标记，通过激光共聚焦显微镜观察到其在萌发的小麦种子中的定殖 情况。 2． 小麦内生菌的多样性 2．1 内生细菌 iano 小麦根内具有种类丰富的内生细菌(6ermida＆Sicil 康小麦根部分离到Microbisporasp．strainEN2、Streptomycessp．strain 作者简介：唐保宏，男，博士，副教授。电话：0371emaih地吐塾@丕蛰：璺血：纽 基金项目：国家自然科学基金 农业微生物资源开发与利用交流研讨会 a]bus et EN46等菌株；Rothballerschmid 菌种群均较为丰富，平均达到5．0×105CFU／g，且在不同组织、生长阶段和地块间有显著差异(乔 spp．等放线菌 类群。 2．2 内生真菌 et 小麦内生真菌类群较为丰富多样。Crous