反复冻融与超高压处理制备脱细胞组织工程血管支架的实验研究.pdfVIP

2009年 12月第20卷第 12期 ChinJAesthP1astSurg，Dec2009Vo1．20No．12 ·761 · 囊 反复冻融与超高压处理制备脱细胞组织工程 血管支架的实验研究 刘 宾， 张蔓菁， 夏 纬， 鲁开化， 郭树忠 作者单位：710032 陕西 西安，第四军医大学西京医院整形外科研究所(刘 宾，夏 纬，鲁开化，郭树忠)；昆明医学院第二附属医院 整形外科(张蔓菁) 第一作者：刘 宾 (1977一)，男，陕西西安人，主治医师，博 t：研究生 ． 通迅作者：鲁开化，710032，第四军医大学西京医院，电子信箱：lukaihua@fmmu．edu．cn 摘【要】 目的 观察不同浓度核酸酶对经反复冻溶加超高压处理后兔股动脉的脱细胞效果。方 法 无菌条件下采取新鲜兔股动脉，去血管外膜后将材料分为未处理组、冻融组、超高压处理组、 冻融+超高压处理，后三组分别于 一8O℃冷冻2h、37℃水浴复温 15min，上述冻融过程反复进行3次。 5000大气压超高压 (4qc)处理20min将供体来源细胞压碎，结合不同浓度核酸酶进行消化，脱去残留细 胞碎片形成脱细胞血管支架。通过组织学和超微结构观察 ，对不同浓度核酸酶脱细胞效果进行评价， 测定反复冻融加超高压处理对血管材料生物力学特性的影响。结果 组织学显示 ，经反复冻溶加超高 压处理后的血管材料，可在较短的时问内被较低浓度核酸酶除去血管支架 内的供体细胞成分，脱细胞 支架的主要生物力学性能指标与正常血管相 比，无明显改变。结论 反复冻溶加超高压脱细胞方法可 以明显缩短脱细胞血管基质的制备周期，为脱细胞组织．T二程血管支架的快速高效制备提供一种新的思 路和方法。 【关键词】 组织工程血管；超高压；反复冻融； 脱细胞组织工程血管支架 doi：10．3969／j．issn．1673—7040．2009．12．020 【中图分类号】R318．08 【文献标志码】A 【文章编号】1673-7040(2009)12~761-04 Investigationofthetissue-engineered acellularvascularscaffoldwith assistanceofrepeatedfreezetha· wingandultrahighpressuretreatment Bin，ZHANGMan-ring，XIAWei，eta1．(DepartmentofPlasticSurgery，XijingHospital，the[burthMili— taryMedicalUniversity，Xian710032，China) Abstract： Objective Toobservethedecellularizationresultsofdifferentconcentrationnucleasesolu— tionsaftertherabbitfemoralarte~ beingtreatedbyrepeatedfreezethawingandultrahighpressure．Methods Vesselswereisolatedundersterileconditionsanddividedintofourgroups(normal，rfeezethawing，ultrahigh pressure，rfeezethawingandultrahighpressure)，thenvesselsinthelatterthreegroupsweretreatedbyrepeat· edfreezethawingand5000arm ultrahighpressureat4℃ fordisruptionofdonorcells．Variousconcentrationof nucleasesolutionswereusedtowashoutthecelldebris．Thenappraisedtheacellularscaffoldbyhistological anduhrasturcturalobservation，evaluatedthebiomechanicsofthebloodvesselsthattre