分光光度法测定大豆总甾醇含量的研究.pdfVIP

维普资讯 2005年第 30卷第4期 中 国 油 脂 45 文章编号 ：1003—7969(2005)04—0045—03 中图分类号：TQ645．9 8 文献标识码 ：A 分光光度法测定大豆总甾醇含量的研究 刘 蕾 ，陈 星 ，李晓丽 ，邱炳源 (1．长春大学国家大豆深加工技术研究推广中心，130022长春市； 2．吉林农业大学资源与环境学院，130118长春市) 摘要：采用改进的分光光度法测定大豆总甾醇含量。测定结果表明，该方法快速、简便 、有较好 的精密度和 回收率，精 密度标准偏差 S=0．0018，变异 系数 Cv=1．41％，样 品回收率在 97、3％ ～ 101．9％之 间。平均回收率为 99．5％，样 品的呈色反应 明显，呈色稳定时间 1h。 关键词 ：分光光度法 ；大豆总 甾醇 ；含量 大豆 甾醇是一种类似于环状醇结构 的物质 ，主 化合物 ，其吸光度与 甾醇类化合物含量成正比，可用 要存在于大豆油的不皂化物 中 lJ。大豆 甾醇是一种 分光光度计进行定量测定。 重要的生理活性物质，它能有效降低血清 中胆固醇 I 材料与方法 水平 ，起到预防和治疗高血压、冠心病等心血管疾病 I．I 原料试剂 的作用。另外还具有抗炎作用，并有阻断致癌物细 样品大豆 甾醇粗品：自制 ，以大豆油脚为原料制 胞形成 的功能等多方 面生理特性Ll2J。除医药领域 得 。 外 ，在食品、化工等领域 甾醇也有广泛的用途 。 10％FeC13：称取 10gFeC13·6H2O(AR)溶于85％ 随着甾醇的深入研究与开发 ，其分析方法的研 浓磷酸中，用磷酸定容至 100mL，贮于棕色瓶 中，冷 究工作也在 陆续展开。甾醇的定量分析方法较 藏 ，可保存一年。 多 3 J，早期的分析方法有毛地黄皂苷法、Lieberman 磷硫铁显色剂：取 10％FeC13液 1．5mL于 100 — Burchard比色法 ，主要应用在医学上测定血清胆 mL棕色容量瓶中，用浓硫酸 (AR)定容至刻度。 固醇 ，这两种方法受各种试剂比例关系和含水量的 豆甾醇标准溶液：准确称取豆甾醇标样 (Merck 影响较大 ，后来做了较大的改进，提高了甾醇测定的 公司提供 )100、0mg，溶 于无水乙醇 中，定容至 100 精确性。 目前主要分析方法有薄层扫描法、气相色 mL，豆甾醇含量为 1．00mg／mL，贮于棕色瓶 ，低温保 谱法和高效液相色谱法。这些方法分析精度高，可 存备用。使用时吸取上述储备液 10mL，用无水乙 检测总甾醇含量和甾醇的组成，但操作烦琐 ，检测成 醇定容至 100mL，此时豆 甾醇含量为 100 g／mL。 本高，不适用于工业生产 中检测总 甾醇含量 。为寻 1，2 主要仪 器 求一种简单 、快捷 、准确且低成本的测定方法，我们 UV一2201型 日本岛津紫外一可见分光光度计。 对用于医学测定血清胆固醇的 Lieberman—Burchard 1．3 方 法 比色法进行了实验研究，经改进提出了一种测定大 1．3．1 豆 甾醇标准 曲线的制作 取 10mL干燥试 豆总甾醇含量的分光光度法 。 管6支编号，分别按表 1添加试剂。而后在室温下 大豆甾醇 主要包括豆 甾醇 、谷 甾醇 、菜籽 甾醇 显色 15min，在 520am下用分光光度计分别测定其 等 ，都是由菲的骨架与一个五环稠合起来 ，成为环戊